食品安全贝类中神经性贝类毒素的测定.pptx

中华人民共和国国家标准

GB5009.261—2016

食品安全国家标准

贝类中神经性贝类毒素的测定

中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局

2016-12-23发布

2017-06-23实施

发布

本标准代替SN/T1573—2013《出口贝类中神经性贝类毒素检验方法小鼠生物法》。本标准与SN/T1573—2013相比,主要变化如下:

—标准名称修改为“食品安全国家标准贝类中神经性贝类毒素的测定”。

GB5009.261—2016

前言

Ⅰ

GB5009.261—2016

食品安全国家标准

贝类中神经性贝类毒素的测定

1范围

本标准规定了贝类中神经性贝类毒素(NSP)检测的小鼠生物测定方法。

本标准适用于贝类及制品中神经性贝类毒素(NSP)的检测。

2原理

用乙醚提取贝类中神经性贝类毒素,提取物经减压蒸干后,再以1%吐温-60生理盐水为分散介质,制备NSP-1%吐温-60生理盐水混悬液,将该混悬液注射入腹腔,观察小鼠存活情况,计算其毒力。

3试剂和材料

除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。

3.1试剂

3.1.1盐酸(HCl)。

3.1.2无水乙醚(C4H10O)。

3.1.3吐温-60(C64H126O26)。

3.1.4氯化钠(NaCl)。

3.1.5次氯酸钠(NaClO)。

3.2试剂配制

3.2.1氯化钠溶液(0.85%):称取0.85gNaCl,加水溶解并定容至100mL。

3.2.21%吐温-60:称取1.0g吐温-60,用0.85%氯化钠溶液溶解并定容至100mL。

3.2.3次氯酸钠溶液(5%):称取次氯酸钠50g,用水溶解,并稀释至1000mL。

3.3标准品

短裸甲藻毒素标准品(brevetoxin-2),纯度≥90%。

3.4材料

小白鼠:体重为19g~21g的健康ICR品系雄性小鼠。

4仪器和设备

4.1旋转蒸发器。

4.2均质器。

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GB5009.261—2016

4.3天平:感量为0.1g。

4.4分液漏斗。

4.5圆底烧瓶。

4.6布氏漏斗。

4.7一次性注射器:1mL。

4.8离心机:转速≥6000r/min。

4.9金属筛网:孔径约2mm。

5分析步骤

注:橡胶手套、玻璃制品等用过的器材,以及废弃的提取液应在次氯酸钠溶液(5%)中浸泡1h以上,以使毒素分解。

5.1试样制备

5.1.1样品采集

每个分析样品至少要取10个以上贝类,并使贝肉达200g以上。

冷冻样品置于保温盒中冷冻送检,或保证其处于低温状态(0℃~10℃)送检。如为带壳样品,应开壳去除水分后冷冻送检。

5.1.2试样制备

5.1.2.1生鲜带壳样品

用清水将贝壳外表彻底洗净,切断闭壳肌,开壳,用水淋洗内部去除泥沙及其他外来物。将闭壳肌和连接在胶合部的组织分开,取出贝肉,切勿割破肉体。开壳前不要加热或用麻醉剂。收集200g贝肉放在孔径约2mm的金属筛网上沥水5min,捡出碎壳等杂物,将贝肉均质,备用。

5.1.2.2冷冻样品

在室温下,使冷冻样品呈半冷冻状态。带壳冷冻样品,按5.1.2.1方法清洗、开壳、淋洗取肉,除去贝肉外部附着的冰片,抹去水分后,室温缓化。收集200g贝肉放在孔径约2mm的金属筛网上沥水5min,将贝肉均质,备用。

5.1.2.3贝类罐头

将罐头内容物沥干水分,倒入均质器充分均质,备用。

5.1.2.4贝肉干制品

称取100g干制品放入足量清水中浸泡24h~48h(4℃冷藏),沥干、均质、备用。

5.1.2.5盐渍品

用清水洗涤,流水脱盐,沥干,均质、备用。

5.2试样提取

取100g试样到500mL烧杯中,加入5g氯化钠和1mL浓盐酸。搅拌均匀。边搅拌边加热混合物至沸腾,文火煮5min,冷却至室温。

将混合物移至500mL离心管中,用50mL乙醚冲洗烧杯,将冲洗液一同移