一种在菌落总数测定中防止芽胞杆菌 菌落弥漫生长的方法.pdfVIP

随着食品工业发展，食品种类越来越多，生产原料品种越来越广，加工工艺也越来越复杂，

但微生物的污染仍然无法避免，特别是糕点、面点等含高淀粉类食品受芽胞杆菌污染的机率

大，加工过程中难以彻底灭菌，菌落计数时琼脂平板上就会出现菌落弥漫生长的现象，导致

菌落难以计数，对菌落总数检验项目的准确性造成严重的干扰。

需氧细菌的新陈代谢作用能将2，3，5－三苯基氯化四氮唑（TTC）还原为红色的三苯甲

臢（TPF），使得菌落呈红色，故可以将TTC作为细菌生长的指示剂，同时TTC对细菌

的生长有一定的抑制作用。因此，可以利用TTC这一特性，寻求抑制菌落弥漫生长的有效

方法，便于菌落计数。

郑连宝，陈文祥，嵇林风等取适宜稀释度的枯草芽胞杆菌（Bacillussubtilis）、蜡样芽

胞杆菌（Bacilluscereus）、大肠埃希菌（Escherichiacoli）、金黄色葡萄球菌

（Staphylococcusaureus），在平板计数琼脂培养基【平板计数琼脂（PCA）培养基】中分

别添加0.01%、0.05%、0.08%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.8%、1.0%TTC

水溶液，同时以不添加TTC的计数琼脂培养基作为对照，观察细菌的生长状况。结果TTC

浓度为0.2%～0.3%时，能有效防止枯草芽胞杆菌和蜡样芽胞杆菌在计数琼脂培养基上

出现菌落弥漫生长，同时对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的生长无显著影响。

不同浓度TTC对细菌生长的影响

当枯草芽胞杆菌和蜡样芽胞杆菌菌液稀释浓度分别为10－5和10－6时，菌落数在适

宜计数范围(30cfu/ml～300cfu/ml)。

从表1可知，不同浓度TTC对细菌生长呈现不同的抑制效果。低浓度TTC对菌落总数计

数无显著影响。

不同浓度TTC对枯草芽胞杆菌和蜡样芽胞杆菌菌落形态的影响

由图1和图2所示，不同浓度TTC对枯草芽胞杆菌和蜡样芽胞杆菌菌落形态也呈现出3种

状态。

TTC浓度为0.2%～0.3%时，菌落颜色愈红，菌落形态与直径大小接近对照组，但计数平

板上菌落弥漫生长现象基本消失。

综上所述，TTC浓度为0.2%～0.3%时，能有效防止枯草芽胞杆菌和蜡样芽胞杆菌在计数

琼脂上出现菌落弥漫生长，同时对细菌的生长无显著影响，而覆盖法防止菌落弥漫生长的效

果欠佳。因此，食品微生物检验中测定菌落总数时，遇到易受芽胞杆菌污染的食品，可在琼

脂中加入0.2%～0.3%的TTC防止菌落出现弥漫现象而导致无法计数的情况发生。