药物分析第十一章抗生素.pptVIP

溶液配制供试品溶液：取本品0.25g，精密称定，置回流瓶中，加入5ml新鲜配制的硫酸-甲醇溶液（397?）溶解，加热回流1h，冷却，用甲醇冲洗冷凝管，合并冲洗液，并用甲醇定量稀释成每1ml中含10mg的溶液，作为供试品溶液。对照溶液：精密称取甘露糖对照品约36mg，置回流瓶中，同法处理后定量制成每1ml中含72?g的溶液，作为对照溶液。*第28页，共41页。TLC方法薄层板：硅胶G点样：各10μl，分别点于同一薄层板上展开剂：甲苯-醋酸-甲醇（5025?25?）显色剂：新鲜配制的1，3-萘二酚与硫酸混合溶液，在110?C加热数分钟显色。限度：供试品溶液所显链霉素B斑点的颜色与对照溶液的主斑点比较，不得更深（3.0%）。L=×100%×100%=3.0%70×4.1310×1000C×4.13S×1000根据1mg甘露糖相当于4.13mg的链霉素B，则:限量？*第29页，共41页。**药物分析第十一章抗生素第1页，共41页。（优选）药物分析第十一章抗生素*第2页，共41页。本法的优点：灵敏、用量小，结果直观适用范围广：纯度好的、差的制品，已知或新发现的抗生素均适用，同一类型的抗生素不需分离，可一次测定其总效价。缺点：操作步骤多，测定时间长，误差大等。*第3页，共41页。理化方法——适用于提纯的产品以及化学结构已确定的抗生素优点：迅速、准确、有较高的专属性。缺点：对含有具同样官能团杂质的供试品不适用，或需采取适当方法加以校正。而且当该法是利用某一类型抗生素的共同结构部分的反应时，所测得的结果，往往只能代表药物的总的含量，并不一定能代表抗生素的生物效价。*第4页，共41页。第二节β-内酰胺类抗生素头孢菌素族青霉素族一、化学结构与性质*****6-氨基青霉烷酸7-氨基头孢菌烷酸*第5页，共41页。酸性：青霉素和头孢菌素分子中的游离羧基具有相当强的酸性，大多数青霉素的pKa在2.5～2.8之间，能与无机碱或某些有机碱形成盐。旋光性：青霉素族分子中含有三个手性碳原子，头孢菌素族含有两个手性碳原子，故都具有旋光性。*第6页，共41页。β-内酰胺环的不稳定性：β-内酰胺环是该类抗生素的结构活性中心，其性质活泼，是分子结构中最不稳定部分，其稳定性与含水量和纯度有很大关系。在酸、碱、青霉素酶、羟胺及某些金属离子（铜、铅、汞和银）或氧化剂等作用下，易发生水解和分子重排，导致β-内酰胺环的破坏而失去抗菌活性。*第7页，共41页。二、鉴别试验（一）呈色反应羟肟酸铁反应青霉素及头孢菌素在碱性中与羟胺作用，β-内酰胺环破裂生成羟肟酸；在稀酸中与高铁离子呈色。茚三酮反应（侧链含?-氨基酸结构）与重氮苯磺酸的偶合反应（侧链含酚羟基）硫酸-甲醛试验*第8页，共41页。（二）各种盐的反应钾、钠离子的火焰反应有机胺盐的特殊反应（如普鲁卡因青霉素的重氮化-偶合反应）（三）色谱法高效液相色谱法（HPLC）薄层色谱法（TLC）中国药典收载的头孢菌素族药物和大多数青霉素族药物采用HPLC法进行鉴别。*第9页，共41页。（四）光谱法IR——各国药典对收载的β-内酰胺类抗生素几乎均采用了本法进行鉴别。该类抗生素共有的特征峰：?－内酰胺环羰基的伸缩振动（1750～1800）仲酰胺的氨基、羰基的伸缩振动（3300cm-1±，1525cm-1±，1680cm-1±）羧酸离子的伸缩振动（1600cm-1±、1410cm-1±）UV——利用最大吸收波长鉴定法或利用水解产物的最大吸收波长鉴定法。*第10页，共41页。三、特殊杂质的检查本类抗生素的特殊杂质主要有高分子聚合物，有关物质，异构体等，一般采用HPLC法控制其量，也有采用测定杂质的吸收度来控制杂质量的。*第11页，共41页。聚合物——HPLC法聚合物的检查采用分子排阻色谱法。分子排阻色谱法的分离原理为凝胶色谱柱的分子筛机制。色谱柱多以亲水硅胶、凝胶或经修饰凝胶如葡聚糖凝胶（sephadex）和聚丙烯酰胺凝胶（sepharose）等为填充剂。现以头孢他啶中头孢他啶聚合物的测定为例*第12页，共41页。色谱条件与系统适用性试验用葡聚糖凝胶G-10（40～120?m）为填充剂，玻璃柱内径1.3～1.5cm，床体积50～60mL；流动相A为含3.5%硫酸铵的0.01mol/L磷酸盐缓冲液（pH值7.0），流动相B为0.01%十二烷基硫酸钠溶液；流速为每分钟1m