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第2章细胞工程
第2节动物细胞培养
动物细胞工程常用的技术:
●动物细胞培养动物细胞工程的基础
●动物细胞融合
●动物细胞核移植等;
一动物细胞培养;
健康皮肤?能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤?
可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增;
目前,科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养,以获得适合临床上使用的人造皮肤;;
思、议
1.动物细胞工程常用的技术有哪些?
2.动物细胞工程的基础是什么?
3.什么是动物细胞培养(概念)
4.动物细胞培养的条件有哪些?
5.动物细胞培养过程?
6.注意相关概念:
什么是细胞贴壁?接触抑制?原代培养?传代培养?
7.干细胞的类型有哪些?应用如何?;
动物细胞培养
1.概念
从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖;
将细胞所需的营养物质(糖类、氨基酸、无机盐、维生素等)按其种类和_所需量严格配制而成的培养基,称为_合成培养基
②未知成分
使用合成培养基时,通常需加入血清等一些天然成分
原因:血清中含有尚未全部研究清楚的细胞所需的营养物质
(2)培养基的物理性质
培养动物细胞一般使用液体培养基也称为培养液;
糖类、氨基酸、无机盐、维生素等
无菌、无毒的环境
适宜的温度、pH和渗透压;
①适宜的温度:哺乳动物细胞培养的温度多以_36.5±0.5为宜;
②适宜的pH:多数动物细胞生存的适宜pH为
③适宜的渗透压:维持细胞正常的形态和功能。细胞工程;
95%空气+5%CO?的CO?培养箱
维持培养液的pH
培养皿
O?:细胞代谢所必需
CO?培养箱松盖培养瓶
细胞工程9;
二、动物细胞培养的过程
体外培养的动物细胞类型
①悬浮生长类:能够悬浮在培养液中生长增殖。
会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分
裂受阻。
②贴壁生长类:需要贴附于某些基质表面才能生长增殖(细胞贴壁),大多数细胞属于此类。;
二、动物细胞培养的过程
重要名词解释
①原代培养
通常将_分瓶之前的细胞培养,即动物组织经_处理后的初次培养称为
原代培养;
②传代培养将分瓶后的细胞培养称为传代培养;
③细胞贴壁大多数体外培养的细胞需要贴附于某些基质表面才能生长增殖,这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上,这种现象称为细胞贴壁;;
取动物组织
制成细胞悬液
转入培养液进行原代培养
分瓶
进行传代培养;
二、动物细胞培养的过程
重要名词解释
④接触抑制;
取动物组织
用机械的方法或用月胰蛋白酶胶原蛋白酶等处理
分散成单个细胞
制成细胞悬液
问题细胞分裂原代培养受阻
悬浮生长贴壁生长
原因原因分瓶细胞密度
过大、有害代接触
谢物积累和抑制营养物质缺
乏等
传代培养;;;
1.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么?
胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外,长时间的作用
也会消化细胞膜蛋白,对细胞有损伤作用,因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。
2.离心的作用?
在沉淀中得到细胞,同时去掉上清液中的胰蛋白酶
3.动物细胞培养技术有没有体现动物细胞的全能性?
未体现;动物细胞培养只是细胞增殖的过程;
思考?
4.“细胞增殖到互相接触的时候,糖蛋白识别
了这种信息,就会使细胞停止继续繁殖,出现接触抑
制的现象”试结合上述解释,举例说明哪种细胞无接触抑制现象,并阐述原因;
03干细胞培养及其应用
1.干细胞的概念:
动物和人体内保留的具有分裂和分化能力的细胞。
在一定的条件下,干细胞可以分化成其他类型的细胞。
2.干细胞的来源:
干细胞分类
早期胚胎、骨髓和脐带血
等多种组织和器官中。
按来源按分化潜能
3.干细胞的类型:
胚胎干细胞成体干细胞全能干细胞多能干细胞专能干细胞;
早期胚胎中
具有分化为成年动物体内的任何一
种类型的细胞,并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。;
造血干细胞(骨髓、外周血和脐带血中)
神经干细胞(神经系统中)
精原干细胞(睾丸中)
具有组织特异性,只能分化成特定的细胞或组织,不具
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