DB22_T1782-2013_布氏白僵菌粉剂生产技术规程_吉林省.docxVIP

ICS65.100.10

B65

DB22

备案号：37440-2013

吉林省地方标准

DB22/T1782—2013

布氏白僵菌粉剂生产技术规程

TechnicalregulationsforpowderproductionofBeauveriabrongniatii

吉林省质量技术监督局

发布

DB22/T1782—2013

前

言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由吉林省林业厅提出并归口。

本标准起草单位：吉林市林业科学研究院。

本标准主要起草人：张海军、陈玉宝、王有菊、王江、李茂军。

I

DB22/T1782—2013

布氏白僵菌粉剂生产技术规程

1范围

本标准规定了布氏白僵菌一级菌种生产，二级菌种生产，菌剂生产，菌剂干燥、粉碎、包装、储藏，

及质量检验等技术内容。

本标准适用于布氏白僵菌粉剂生产。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T25864-2010球孢白僵菌粉剂

NY/T883-2004农用微生物菌剂生产技术规程

3术语和定义

又名卵孢白僵菌，一种半知菌类的虫生真菌，分类上属于真菌门（Eumycota），半知菌亚门

（Deuteromycotina），丝孢纲（Hyphomycetes），丛梗孢目（Moniliaceae），丛梗孢科（Moniliaceae）、

白僵菌属（Beauveria）。

3.2

马铃薯200g切块（1cm×1cm×1cm）煮沸30min，过滤，取滤液，定容至1000ml，加入琼脂20g，

全部溶解后加蔗糖或葡萄糖20g、牛肉膏1g、蛋白胨1g，煮至完全融化；用盐酸或氢氧化钠调解pH

至5。

按每试管10ml定量分装至20mm×200mm试管中；用纯棉棉塞封盖试管口，松紧适度。

1

DB22/T1782—2013

4.3灭菌

试管直立于高压灭菌锅中，灭菌温度121℃～126℃，压力0.1Mpa～0.15Mpa，时间30min。

4.4摆制斜面

灭菌后，在无菌室的桌面上立即摆放斜面，原则是在培养基不湿棉塞的情况下，尽量延长培养基的

斜面长度；斜面培养基凝固后即可接种。

4.5接种

在无菌条件下，取下原种试管和一级斜面培养基试管棉塞，酒精灯火焰烧灼试管管口3s～5s，用

无菌接种针挑取原种25mm～50mm，接种于一级斜面培养基上，用接种针轻轻来回拉动2次～3次，

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在酒精灯火焰前，用原棉塞封盖试验管口。

4.6一级菌种培养、保存

在25℃恒温培养箱中培养10d～12d，观察剔除污染试管；保存在4℃～5℃冰箱中备用。

4.7菌种复壮

4.7.1复壮条件

复壮条件应参照NY/T883-2004中4.1.5条执行。

4.7.2复壮方法

按麦麸、稻糠和谷糠5：3：2的比例混合，用0.1%KmnO4水溶液按与培养料质量比1：1的比例搅拌均

匀。

将培养料装入600ml普通培养瓶，装瓶至容积的2/3，用耐高温聚丙烯塑料薄膜封口。

灭菌12h后，在超净工作台上，用无菌接种针，按每支一级菌种试管接7瓶～9瓶的数量，将一级

菌种迅速移至二级瓶中，并封盖。

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DB22/T1782—2013

在无阳光直射，23℃～25℃的条件下培养8d～10d。

6菌剂生产

6.1消毒

培养室按5g/m

3

高锰酸钾加10ml福尔马林的用量，进行熏蒸消毒12h；培养盘及塑料薄膜浸入0.1%

高锰酸钾水溶液中消毒1h，擦拭干净备用。

6.2培养料配制

同5.1。

6.3培养料装袋

装于规格为30cm×20cm耐高温聚丙烯菌袋中，每袋装培养料400g～500g，折叠袋口。

6.4灭菌

将培养料袋分层置于高压灭菌锅中，灭菌温度121℃～126℃，压力0.1Mpa～0.15Mpa，时间35min。

6.5接种

灭菌12h后，在无菌条件下，按每瓶二级菌接种1kg培养料充分混合进行扩繁。

6.6装盘、培养

在无阳光直射、通风的室内阴干或用恒温干燥箱30℃快速烘干；干燥的标准为含水率≤10%。

采用40目筛片的电动粉碎机粉碎。

采用密封塑料袋封装，以每袋盛装菌剂5kg为宜，外套编织袋；在干燥、避光条件下储藏，8℃以

下储藏期不超过6个月。

含水率测定方法应参照GB/T25864-2010中5.5条执行。

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DB22/T1782—2013

含水率标准为≤10%。

8.3含孢量测定

含孢量测定方法应参