DB21_T3273-2020_猪伪狂犬病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株TaqMan实时荧光定量PCR鉴别方法_辽宁省.docxVIP

ICS11.220

DB21

B41

辽宁省地方标准

DB21/T3273—2020

猪伪狂犬病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株

TaqMan实时荧光定量PCR鉴别方法

ATaqManReal-timePCRMethodforDifferentiationofWild-typeStrainfrom

gE-deletedVaccineStrainofPseudorabiesVirus

辽宁省市场监督管理局

发布

DB21/T3273—2020

目

次

前言................................................................................II

1

2

3

4

5

6

7

8

范围..............................................................................1

规范性引用文件....................................................................1

缩略语............................................................................1

仪器和耗材........................................................................1

试剂和材料........................................................................1

样品采集、处理和运输..............................................................2

荧光qPCR操作程序.................................................................3

结果判定..........................................................................4

附录A（规范性附录）溶液配制........................................................6

附录B（规范性附录）引物和探针......................................................7

I

DB21/T3273—2020

前

言

本标准根据GB/T1.1-2009的有关规定进行制定。

本标准由辽宁省农业农村厅提出并归口管理。

本标准负责起草单位：辽宁省农业发展服务中心。

本标准起草人：兰德松、顾贵波、周维、杨洺扬、李可心、孙世宇、张健、刘贺、李旭、高原、丁

静。

本标准发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函等方式进行反馈，

我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。

归口管理部门通讯地址：辽宁省农业农村厅（沈阳市和平区太原北街2号），联系电话：024标准起草单位通讯地址：辽宁省农业发展服务中心（沈阳市皇姑区宁山东路29号），联系电话：

024II

DB21/T3273—2020

猪伪狂犬病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株TaqMan实时荧光定量

PCR鉴别方法

1

范围

本标准规定了猪伪狂犬病毒（pseudorabiesvirus,PRV）野毒株及gE基因缺失毒株的TaqMan荧光PCR

检测方法。

本标准适用于猪血液、组织脏器、精液、鼻腔拭子和细胞培养物等材料中PRV核酸的检测以及PRV

野毒株与gE基因缺失疫苗株病毒核酸的鉴别检测。

本标准的实验操作应在生物安全II级实验室（BSL-2实验室）中进行。

2

规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682

NY/T541

分析实验室用水规格和试验方法

兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

糖蛋白D（glycoproteinD）

gE

糖蛋白E（glycoproteinE）

伪狂犬病病毒（pseudorabiesvirus）

荧光PCR仪、高速冷冻离心机（可控温至4℃，离心速度可达12000r/min以上）、组织研磨仪

或研钵、自动化核酸提取仪