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第1页，共31页，星期日，2025年，2月5日超氧化物歧化酶是一种重要的氧自由基清除剂，作为药用酶在美国、德国、澳大利亚等国已有产品。由于SOD能专一性去除超氧阴离子自由基，故引起国内外生化界和医药界的极大关注。目前临床上应用集中在自身免疫性疾病上如类风湿关节炎，红斑性狼疮，皮肌炎等三、超氧化物歧化酶

（Superoxidedismutase,SOD）第2页，共31页，星期日，2025年，2月5日稳定性对热稳定：天然牛血SOD可75℃加热数分钟，对热稳定性与溶液离子强度有关对pH的稳定性：一般pH5.3~9.5较稳定，猪血SOD在pH7.6～9较稳定。吸收光谱1.SOD的性质第3页，共31页，星期日，2025年，2月5日结构特点：金属酶Fe-SOD:Mw38000，2个亚基，每个亚基含1个Fe，存在于中Cu、Zn-SOD:Mw32000，2个亚基，每个亚基含1个Cu，1个Zn，存在于中Mn-SOD:原核细胞中，Mw40000,2个亚基，每个亚基1个Mn真核细胞中，Mw80000，4个亚基，每个亚基1个Mn真核细胞原核细胞第4页，共31页，星期日，2025年，2月5日金属辅基与酶活性关系Cu、Zn-SOD：Zn与分子结构有关，与催化活性无关;Cu与活性有关，对酶活力是必需的Mn-SOD：Mn对酶活力是必需的Fe-SOD：Fe对酶活力是必需的2.生产工艺分离纯化SOD常根据原料，种类和性质的差异而有所不同。第5页，共31页，星期日，2025年，2月5日（1）以牛血红细胞提取Cu、Zn-SOD的工艺第6页，共31页，星期日，2025年，2月5日（2）工艺过程：1）收集、浮选取新鲜牛血，离心除去血浆。2）溶血、去血红蛋白：干净红细胞加水溶血30min，然后加入0.25倍体积的乙醇和0.15倍体积的氯仿，搅拌15min，离心去血红蛋白，收集上清液。3）沉淀、热变性：将上述清液加入1.2～1.5倍体积的丙酮，产生大量絮状的沉淀，离心得沉淀物。再将沉淀物加适量水，离心去不溶物，上清液于60～70℃热处理10分钟，离心去沉淀得浅绿色得澄清液。第7页，共31页，星期日，2025年，2月5日4）柱层析、洗脱、超滤浓缩：将上述澄清液超滤浓缩后小心加到已用2.5mmol/L，pH7.6磷酸缓冲液平衡好的DEAE－sephadexA50柱上吸附，并用pH7.6的2.5～50mmol/L的磷酸盐缓冲液进行梯度洗脱，收集具有SOD活性的洗脱液。5）冷冻干燥第8页，共31页，星期日，2025年，2月5日（2）以牛肝为原料提取Mn-SOD的工艺第9页，共31页，星期日，2025年，2月5日二、胃蛋白酶（Pepsin）胃蛋白酶：是一种消化性蛋白酶，由胃部中的胃粘膜主细胞（gastricchiefcell）所分泌，功能是将食物中的蛋白质分解为小的肽片段。胃蛋白酶也是第一个从动物身上获得的酶。自猪、牛、羊等胃粘膜提取的胃蛋白酶用作助消化药。常与稀盐酸同时用于幼畜消化不良性腹泻和慢性萎缩性胃炎。临床上主要用于因食蛋白过多，引起的消化不良及病后恢复期消化机能减退等。第10页，共31页，星期日，2025年，2月5日1、组成（结构）、性质胃中惟一的一种蛋白水解酶。其最适pH值为1～2。胃蛋白酶作用的主要部位是芳香族氨基酸或酸性氨基酸的氨基所组成的肽键。药用胃蛋白酶是胃液中多种蛋白水解酶的混合物，含有胃蛋白酶，组织蛋白酶，胶原酶等，为粗制的酶制剂。性状：外观为淡黄色粉末第11页，共31页，星期日，2025年，2月5日2、生产工艺（1）工艺路线：猪胃粘膜自溶液上清液成品自溶，过滤H2O,HCl氯仿脱脂浓缩干燥第12页，共31页，星期日，2025年，2月5日（2）工艺过程：①自溶、过滤在夹层锅内预先加水100L及盐酸，加热至50℃时，加入200kg猪胃粘膜，快速搅拌使酸度均匀，保持45~48℃,消化3~4小时。用纱布滤去未消化的组织蛋白，收集滤液。②脱脂、去杂质将滤液降温至30℃以下，静防24~48h，使杂质沉淀除去，得到脱脂酶液。③浓缩干燥取脱脂酶液，在40℃以下浓缩到原体积的1/4，真空干燥，球磨，得到产品。第13页，共31页，星期日，2025年，2月5日三、尿激酶（Urokinase）尿激酶