细胞核与染色质.pptVIP

1、组蛋白(histone)共5种，分为：-核心组蛋白：H2A、H2B、H3、H4帮助DNA卷曲形成核小体的稳定结构。-连接组蛋白：H1，在构成核小体时H1起连接作用,它赋予染色质以极性。特点：真核生物染色体的基本结构蛋白，富含带正电荷的Arg和Lys等碱性氨基酸，属碱性蛋白质，可以和酸性的DNA紧密结合（非特异性结合）；没有种属及组织特异性，在进化上十分保守。尤其是H3、H4。H1保守性较核心组蛋白低.第31页，共71页，星期日，2025年，2月5日2.非组蛋白(nonhistone)-非组蛋白具多样性和异质性-对DNA具有识别特异性，又称序列特异性DNA结合蛋白(sequencespecificDNAbindingproteins)-具有多种功能，包括基因表达的调控和染色质高级结构的形成-带负电，属酸性蛋白功能：帮助DNA折叠、复制；调节基因表达第32页，共71页，星期日，2025年，2月5日序列特异性DNA结合蛋白的不同结构模式-α螺旋-转角-α螺旋模式(helix-turn-helixmotif)-锌指模式(Zincfingermotif)-亮氨酸拉链模式(Leucinezippermotif，ZIP)-螺旋-环-螺旋结构模式(helix-loop-helixmotif，HLH)-HMG-盒结构模式（HMG-boxmotif）第33页，共71页，星期日，2025年，2月5日四、染色质的基本结构单位—核小体(nucleosome)人体的一个细胞核中有23对染色体，每条染色体的DNA双螺旋若伸展开，平均长为5cm，核内全部DNA连结起来约1.7~2.0m。核小体（nucleosome）：一种串珠状结构，由核心颗粒和连结线DNA两部分组成，通过酶消化实验建立。核小体单位包括约200bp的DNA、一个组蛋白核心和一个H1。第34页，共71页，星期日，2025年，2月5日1、主要实验证据（1）铺展染色质的电镜观察：未经处理的染色质自然结构为30nm的纤丝，经盐溶液处理后解聚的染色质呈现10nm串珠状结构nucleosomes(10nm)经盐溶液处理后的染色质condensedform(30nm)未经处理的染色质第35页，共71页，星期日，2025年，2月5日（3）应用X射线衍射、中子散射和电镜三维重建技术研究，发现核小体颗粒是直径为11nm、高6.0nm的扁园柱体，具有二分对称性（dyadsymmetry），核心组蛋白的构成是先形成（H3）2﹒（H4）2四聚体,然后再与两个H2A﹒H2B异二聚体结合形成八聚体 第36页，共71页，星期日，2025年，2月5日由X-射线晶体衍射(2.8A)所揭示的核小体三维结构（引自K.Luger等，1997）a。通过DNA超螺旋中心轴所显示的核小体核心颗粒8个组蛋白分子的位置；b．垂直与中心轴的角度所见到的核小体核心颗粒的盘状结构；c．半个核小体核心颗粒的示意模型，一圈DNA超螺旋（73bp）和4种核心组蛋白分子，每种组蛋白由3个α螺旋和一个伸展的N-端尾部组成。N-端尾部有序排列，参与核小体之间的相互作用，以形成螺线管等高级结构。第37页，共71页，星期日，2025年，2月5日（4）SV40微小染色体（minichromosome）分析与电镜观察约5kb理论上:25个*200bp/个实际数到:23个SV40病毒感染细胞后,利用宿主组蛋白,形成微小染色体第38页，共71页，星期日，2025年，2月5日核小体的性质及结构要点示意图（引自B.Alberts等）在用微球菌核酸酶降解染色质时，反应早期可得到166bp的片段，但不稳定；进一步降解则得到146bp片段，比较稳定。推测可能原因是失去H1后，DNA两端各有10bp的DNA，易被核酸酶作用而降解。第39页，共71页，星期日，2025年，2月5日由H2A、H2B、H3、H4各两分子形成八聚体，构成核心颗粒；DNA分子以左手螺旋缠绕在核心颗粒表面，每圈80bp，共1.75圈，约146bp，两端被H1锁合；相邻核心颗粒之间为一段60bp的连接线DNA。2、核小体结构要点第40页，共71页，星期日，2025年，