生物化学：第九章 核酸的生物合成.ppt

突变类型：1.置换：一个或几个碱基的替换，又称点突变。转换：Py被Py替换或者Pu被Pu替换；颠换：Py被Pu替换或者Pu被Py替换。2.插入：DNA链中插入一个或几个碱基；3.缺失：DNA链中缺失一个或几个碱基。转换插入缺失野生型基因-T-C-G-A-C-T-G-T-A-C-G--A-G-C-T-G-A-C-A-T-G-C--T-C-G-G-C-T-G-T-A-C-G--A-G-C-C-G-A-C-A-T-G-C-颠换-T-C-G-T-C-T-G-T-A-C-G--A-G-C-A-G-A-C-A-T-G-C--T-C-G-A-G-C-T-G-T-A-C-G--A-G-C-T-C-G-A-C-A-T-G-C--T-C-G-C-T-G-T-A-C-G--A-G-C-G-A-C-A-T-G-C-AT（三）修复1.光裂合酶修复：经光照射后，光裂合酶修复嘧啶二聚体。2.切除修复：主要修复机制，在一系列酶作用下切除受损伤部分，以完整的一条链为模板，合成出切去的部分，使DNA恢复正常结构。3.重组修复：受损伤部位DNA复制后留下缺口，在重组酶的作用下，带缺口的DNA与完整的姐妹染色单体的双链DNA进行重组交换。切除修复动画一、转录(transcription)：以单链DNA为模板，NTP为原料，在RNA聚合酶催化下合成RNA的过程。第二节RNA的生物合成第九章核酸的生物合成转录仅以DNA一条链的某一区段为模板，这种转录方式称为不对称转录。二、转录模板：双链DNA分子中作为模板转录出RNA的那条链，称为模板链（反义链，负链）；另一条链称为编码链（有义链、正链）。三、RNA聚合酶：核心酶全酶??????起始因子，带领核心酶识别启动子与DNA模板结合聚合酶活性结合启动子及聚合酶其余组分原核生物只有一种RNA聚合酶。四、转录过程：转录过程分为起始、延伸和终止三个阶段：1.起始：基因上由RNA聚合酶识别、结合并确定转录起始位点的特殊DNA序列称为启动子。-15’3’AATTGCCTGACGTTT***********GACCGT+1编码链5’3’TTAACGGACTGCAAA***********CTGGCA模板链ACGUUU***********GACCGU-10区富含AT，又称为TATAbox或Pribnowbox，有助于DNA双螺旋的局部解链；-35区与转录起始的辨认有关，并决定启动子的强度。①RNA聚合酶全酶识别-35区，并与启动子结合；②在σ亚基作用下从-10区开始解链，在DNA链上形成转录泡；③加入第一个NTP启动RNA合成。RNA的合成不需要引物。转录起始过程：2.延伸：形成启动子-全酶-NTP三元复合物后，新的NTP加入，形成磷酸二脂键。聚合几个核苷酸后，σ亚基从全酶上解离。核心酶沿模板链3’→5’的方向移动，按照碱基配对的原则以5’→3’方向合成RNA链。E.ColiRNA聚合酶以45个核苷酸/秒的速度合成RNA。RNA聚合酶缺乏核酸外切酶活性，不具备校对功能。3.终止：基因末端终止转录的一段特殊DNA序列称为终止子。不依赖ρ-因子的终止子特点：在转录终点前有一段富含G-C的回文序列，其下游有6—8个T。终止子序列被转录后回文序列形成发夹结构，使聚合酶减慢或暂停RNA合成。发夹结构之后转录出一系列U，RNA-DNA杂交链中的U-A碱基配对结构不稳定，极易被破坏，导致RNA-DNA杂交链在终止区解链，RNA聚合酶脱离模板，使转录终止。（4）真核生物的DNA聚合酶引物合成。复制的主要酶。参与DNA的修复。在复制过程中起校读、修复和填补缺口的作用。线粒体DNA复制。DNA-pol?DNA-pol?DNA-pol?DNA-pol?DNA-pol?（5）引物酶(primase)依赖DNA的RNA聚合酶，。可以催化游离NTP聚合形成小片段RNA，。催化RNA引物的生成，对于DNA合成是必需的，在大肠杆菌，是dnaG基因的表达产物。引物（primer）：DNA聚合酶不能从头合成一条新的DNA链，而必须有一段RNA引物（十多个至数十个核苷酸不等），作为DNA复制的起始点，引物的3’-OH，必须是游离的。引物酶与经典的RNA聚合酶不同，对利福平不敏感。引物酶单独存在时相当稳定，只有在与有关蛋白质组成复