核酸代谢转录与加工.pptVIP

RNA聚合酶Ⅱ识别类别Ⅱ启动子，转录mRNA。基本启动子A.TATA框（Hognessbox）中心-25至-30，长度7bp。频率：T82A97T93A85A63（A37）A82A60（T37）功能：DNA双链解开，并决定转录的起点位置，失去TATA框，转录将可能在许多位点上开始。第30页，共69页，星期日，2025年，2月5日TATA框的改变或缺失，直接影响DNA与酶的结合程度，使转录起始点偏移。因此，TATA是许多数真核基因正确表达所必需的。由于RNA聚合酶分子有相对固定的空间结构，同TATA框的结合位点和转录反应催化位点的距离，决定了起始位点的正确选择。启动子特定序列和酶的正确结构，这两者把酶置于一种正确的构象中，决定了识别的正确性和转录起始的正确性。第31页，共69页，星期日，2025年，2月5日B.CAAT框中心在-75处，9bp，共有序列GGT（G）CAATCT功能：与RNA聚合酶结合。可与CTF结合，控制转录起始活性。CTF:CAAT-bindingtranscriptionfactorC.GC框（GCisland）在CAAT框上游，序列GGGCGG，与某些转录因子结合，CAAT和GC框均为上游因子，对转录的起始频率有较大影响。第32页，共69页，星期日，2025年，2月5日真核启动子区第33页，共69页，星期日，2025年，2月5日类别Ⅲ启动子RNA聚合酶Ⅲ识别的启动子，转5SrRNA、tRNA和胞质小RNA（scRNA），在转录区内部。核内小RNA（snRNA）的启动子在转录起点上游。第34页，共69页，星期日，2025年，2月5日5、终止子和终止因子提供转录终止信号的一段DNA序列称为终止子(terminator)。协助RNA聚合酶识别终止子的辅助因子称为终止因子（属于蛋白质）。有些终止子的作用可被特异的因子阻止，使酶越过终止子继续转录（通读）。这类引起抗终止作用的蛋白质称为抗终止因子。终止子位于已转录的序列中，DNA的终止子可被RNA聚合酶或其辅助因子识别。第35页，共69页，星期日，2025年，2月5日（1）强终止子--不依赖于ρ的终止子具有发夹结构及polyU。回文对称区富含G.C，polyU可能提供使RNA聚合酶脱离模板的信号。（2）依赖ρ的终止子必需在ρ因子存在时才能引发终止，回文结构不富含G.C，无polyU结构。ρ因子：55000蛋白质，可水解三磷酸核苷。ρ因子能与RNA聚合酶结合但不是酶的组分，它的作用是阻止RNA聚合酶向前移动，于是转录终止，并释放出已转录完成的RNA链。通读往往发生在强启动子、弱终止子的基因上。第36页，共69页，星期日，2025年，2月5日终止子第37页，共69页，星期日，2025年，2月5日8.3.2.3RNA转录后的加工转录后加工：RNA聚合酶合成的原初转录产物，经过剪切、修饰、拼接等过程，转变成成熟的RNA分子。第38页，共69页，星期日，2025年，2月5日1、mRNA前体的加工：原核生物mRNA转录后一般不需要加工，转录的同时即进行翻译（半寿期短）。亦有少数多顺反子的mRNA需要核酸酶切成小单位，然后再翻译。真核生物mRNA（半寿期较长）原初产物很大，被称为核内不均一RNA（heterogeneousnuclearRNA，hnRNA)，需要进一步进行加工修饰转化为mRNA。第39页，共69页，星期日，2025年，2月5日真核生物mRNA加工顺序：5’端连接“帽子”结构3’端切除，添加polyA“尾巴”hnRNA被剪接，剪掉内含子（introns），拼接外显子（exon)分子内部的核苷酸甲基化修饰RNA编辑（RNAediting）第40页，共69页，星期日，2025年，2月5日3’端切除，添加polyA“尾巴”第41页，共69页，星期日，2025年，2月5日mRNA的剪接（Splicing)多数真核基因是不连续的、断裂基因（interruptedgene)，其转录产物需要剪接。mRNA的剪接包括3种类型：类型I自我拼接类型II自我拼接mRNA前体的拼接第42页，共69页，星期日，2025年，2月5日Fig.真核mRNA第43页，共69页，星期日，2025年，2月5日hn