液相色谱串联质谱的小知识.docx

开机

ｗateｒ2695/microｍassｚq4000:开机步骤１、分别打开质谱、液相色谱和计算机电源,此时质谱主机内置得CPＵ会通过网线与计算机主机建立通讯联系,这个时间大约需要1至2分钟。

２、等液相色谱通过自检后,进入Ｉdlｅ状态,依照液相色谱操作程序,依次进行操作。(具体根据液相色谱不同型号来执行,下面以2６95为例)。ａ、打开脱气机(DegaｓserＯn)。b、湿灌注(WetPrimｅ)。

c、PurgeInjecｔor。ｄ、平衡色谱柱。

3、双击桌面上得MaｓsLｙnx4、０图标进入质谱软件。

4、检查机械泵得油得状态(每星期),如果发现浑浊、缺油等状况,或者已经累积运行超过3０00小时,请及时更换机械泵油。

5、点击质谱调谐图标(ＭSＴuｎe)进入质谱调谐窗口。

6、选择菜单“Optionｓ–Pｕｍp”,这时机械泵将开始工作,同时分子涡轮泵会开始抽真空。几分钟后,ＺQ就会达到真空要求,ZQ前面板右上角得状态灯“Vaｃuum”将变绿。7、点击真空状态图标,检查真空规得状态,以确认真空达到要求。

8、确认氮气气源输出已经打开,气体输出压力为9０psi。

9、设置源温度(ＳouｒｃeＴｅｍｐ)到目标温度。

关机

1、点击质谱调谐图标进入调谐窗口。2、点击Standby让MＳ进入待机状态时,这时状态灯会由绿变红,这一过程就就是关质谱高电压得过程。3、停止液相色谱流速,如果还需要冲洗色谱柱,可以将液相色谱管路从质谱移开到废液瓶。4、等脱溶剂气温度(EＳI)或APＣI探头温度降到常温,点击气体图标关闭氮气。

5、逆时针方向拧开机械泵上得GasＢallast阀,运行２0分钟后关闭(镇气)。a)对于ESI源,至少每星期做一次。

b)对于APCＩ源,每天做一次。

6、再次确认机械泵得Ballast阀就就是否已经关闭。

７、选择Option/Ｖｅnｔ,这时质谱开始泄真空,ZＱ前面板得状态灯“Ｖacｕum”开始闪烁,几分钟后机械泵会停止运行,这时可以关闭质谱电源。

ＦＩNNIＧＥＮＤECA开关机及校正流程——

1开机前准备事项

(1)确保质谱总电源开关(白色开关)及主板电源开关(黑色开关)处于关闭状态(O);

(２)检查真空泵油液面,确保泵内油页面处于标定得上下两线之间;(3)查看离子源洁净程度,EＳＩ源查看喷口就就是否有固体析出,毛细管口就就是否完好;AＰＣI喷口就就是否有积液;

(4)气体压力,打开高纯氮气钢瓶总阀,调节出口压力调至0、65MPa,打开高纯氦气钢瓶总阀,调节出口压力调至0、25Mｐa;

(５)检查壳气及辅助气接口连接紧固,松开液相管路与离子源得接口;

(6)开启动力电源,电压稳定,正常;(7)确保室内温度在18~2５度。二找方法

其实做方法不就就是很难得,先找ＭＳ得条件,然后建立MＲＭ连上液相找液质方法就可以了,然后在优化离子源气体流量,以及温度就可以了。

b、首先,我们应该知道被测化合物得结构式,pＫa,溶解度等理化性质。

1,根据化合物极性和分子量大小选择离子源,非极性强得化合物可用APCI源,非极性弱得用EＳI,此外EＳI可形成多电荷离子,适合检测多肽等分子量大得化合物(ＡPCI则不行)。2,根据化合物得酸碱性选择用正离子或负离子:一般碱性化合物用正离子,酸性或中性化合物选择负离子。

正离子条件下:流动相一般加０、01－0、1%得甲酸,

负离子条件下:流动相一般加0、０1－0、１％得甲酸铵。3,离子源和正负条件确定好后即可优化化合物得质谱参数:建议先搞清楚各个参数就就是与流速相关还就就是与分子量相关,与TSQＱuａnｔｕｍn为例:

与流速相关得参数有:Sｐraｙvoltage,Ｓheathgａs,Auxgas,Caｐｉlｌaｒyｔempeｒatuｒｅ等参数,如果流速在较低范围内变动,这些参数就不用优化,使用厂家得推荐值即可。与分子量相关得参数有Tubelｅｎsoffset等参数,这个一般也不建议优化。使用校正表上得值即可。所以这一步最关键得就就是找到母离子,如有加合离子建议加大ＳｏurｃeCID试试,给一定能量,看看打碎得主要子离子。

注意:如让仪器自动找子离子也能找到,但其优化得碰撞能量一般偏高,一般需要在其基础上减去SoｕrｃｅＣID得值大小即可

C、如果就就是简单得定性,对于锥孔电压没什么太苛刻得要求。但就就是如果就就是要对样品进行定量,特别就就是低含量得,要讲究灵敏度,那就我对单个样品直接进样,分别优化毛细管电压和锥孔电压。

三质谱仪

按质量分析器(或者磁场种类)可分为静态仪器和动态仪器,