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PCR的原理：1.为可选择性扩增,要有特异引物2.要有前身物、聚合酶和离子3.是链式反应，每一周期经过变性、复性和延伸三步4.一周期后DNA倍增第31页，共58页，星期日，2025年，2月5日PCR的过程：变性（92-95；1分钟）复性（40-60；1分钟）延伸（72；1.5分钟）第32页，共58页，星期日，2025年，2月5日5’3’3’5’变性5’3’3’5’特异引物复性5’3’5’3’3’5’3’5’DNA聚合酶延伸3’5’5’3’PCR第33页，共58页，星期日，2025年，2月5日以?地贫基因诊断为例由于中国人α地贫80%以上为东南亚型缺失型（--SEA/）,该突变的缺失范围约20kb基因片段。因此，采用跨越断裂点PCR法（gap-PCR）,一次即可诊断出各种基因型。PCR的应用第34页，共58页，星期日，2025年，2月5日第35页，共58页，星期日，2025年，2月5日α1α2α1α2第36页，共58页，星期日，2025年，2月5日Multi-PCR第37页，共58页，星期日，2025年，2月5日PCR-SSCP1989年，Orita等建立的PCR产物单链DNA凝胶电泳技术。12345ab1：正常人；2,4,5：纯合体患者；3：杂合体(2的弟弟)左为泳动变位模式：a正常人；b纯合体患者第38页，共58页，星期日，2025年，2月5日PCR-SSCPGAA→GAGTGT→TATCTC→CAC第39页，共58页，星期日，2025年，2月5日第40页，共58页，星期日，2025年，2月5日PCR-DHPLCDHPLC（变性高效液相色谱）进行基因突变检测的原理DHPLC进行基因突变检测是基于异源双链的形成和不同的双链与吸附拄的结合牢固程度不同。第41页，共58页，星期日，2025年，2月5日关于单基因病诊断详解第1
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