2024-2025学年高中生物同步备课系列【备教案】1.2.2 微生物的选择培养和计数 -人教2019版选择性必修3.docx

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第1章发酵工程

第2节微生物的培养技术及应用

二微生物的选择培养和计数教案

一、教学目标

1.利用选择培养基分离细菌，运用相应技术解决生产生活中有关微生物的计数。（科学探究）

2.关注有害生物的控制、宣传健康的生活方式等。（社会责任）

二、教学重难点

【教学重点】土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。

【教学难点】土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。

三、教学过程

【新课导入】

展示：问题探讨及问题。

科学实例：寻找耐高温的DNA聚合酶

聚合酶链式反应（PCR）是一种在体外扩增DNA片段的技术，此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。

1973年，科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌，进而提取出耐高温的DNA聚合酶。这种酶目前已被广泛用于聚合酶链式反应（PCR）。

思考讨论：

1.筛选水生栖热菌的思路是什么样的？

提示：根据微生物对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。

2.为什么水生栖热菌能从热泉中筛选出来呢？

提示：这是因为水生栖热菌能在70～80℃的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。

问题：那么，如何从众多的微生物中筛选出单一菌种？

【新课讲授】

（一）选择培养基

教师：组织学生阅读教材P16页，引导学生说出实验室中微生物筛选的原理，并归纳选择培养基的概念及类型。

学生：阅读教材，自主学习，归纳概括。

1.实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌生长的条件（包括营养、温度和pH等），同时抑制或阻止其他微生物的生长。

2.选择培养基的概念：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。

3.选择培养基的类型：

教师：结合教材内容，并通过查阅相关资料，引导学生进行思考、讨论交流，进而归纳出选择培养基的类型。同时让学生绘制相关表格，进一步加深对知识的理解与记忆。

学生：查阅资料，讨论交流，归纳概括，绘制表格。

（1）利用改变培养条件进行选择培养。

70～80℃的高温→分离耐高温的水生栖热菌。

（2）利用添加某种化学物质进行选择培养。

加入青霉素→分离酵母菌、霉菌等真菌。

加高浓度食盐→金黄色葡萄球菌。

（3）利用营养缺陷进行选择培养。

不加碳源（含碳有机物）的培养基→分离出自养型微生物。

不加氮源的培养基→分离出固氮菌。

提出问题：怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌?

学生：踊跃回答问题。

提示如下：

思考·讨论选择培养基配方的设计

尿素［CO（NH2）2］含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，会被土壤中的某些细菌分解成NH3，再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可以作为细菌生长的氮源。

小组合作，问题探究：

1.如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？

提示：在选择培养基中，以尿素作为唯一氮源，可以将分解尿素的细菌分离出来。

培养基的配方中应含有微生物生长所需的营养要素：碳源、氮源、水、无机盐等。由于绝大多数微生物都能利用葡萄糖，分解尿素的细菌也能利用葡萄糖，可以用葡萄糖作为碳源。但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，在培养基中加入尿素提供氮源，使培养基具有了选择作用。该培养基以尿素作为唯一氮源，只允许能以尿素作为氮源的微生物生长。

2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？

提示：这种培养基与普通培养基相比，只是用尿素作为唯一氮源，培养基的其他营养成分基本相同。

该培养基与普通培养基相比较：

共同点：都是以有机碳（如葡萄糖）作为碳源，都有水和无机盐；

不同点：是该培养基以尿素作为唯一氮源，使只有能以尿素作为氮源的微生物生长。

（二）微生物的选择培养

如果想知道1g土壤中有多少能分解尿素的细菌，还需要对土样进行适当的处理以及科学的测定微生物数量的方法——稀释涂布平板法。

教师：组织学生阅读教材P17页，引导学生归纳稀释涂布平板法的概念、实验操作流程及注意事项。

学生：阅读教材，自主学习，归纳概括。

1.方法——稀释涂布平板法

微生物选择培养获取纯培养物的方法：稀释涂布平板法。对样品进行充分稀释，然后将菌液涂布到制备好的选择培养基上。

稀释涂布平板法的概念：将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

注意：稀释度足够高时，能在培养基表面形成单个菌落。包括系列稀释（梯度稀释）和涂布平板两个步骤。基本操作：（1）梯度稀释；（2）涂布平板。

2.操作步骤

展示稀释涂布平板发操作示意图：

①铲取土样，将样品装入纸袋中。

注意：取土样用的小铁铲和盛土样的的信