分子病理学技术讲稿.ppt

8．淋巴造血组织肿瘤及其标记物：(１)LCA（LeucocyteCommonAntigen，白细胞共同抗原）；(２)CD19，CD25，CD20－－标记Ｂ淋巴细胞；(３)CD4，CD8，CD3－－标记Ｔ淋巴细胞；(４)ＭＡＣ３８７、Ｌｙｓｏｚｙｍｅ－－标记组织细胞；(５)ＣＤ１５、ＣＤ３０（Ki-antigen）－－标记Ｒ－Ｓ细胞；(６)CD11，CD14－－标记单核细胞、粒细胞。第30页，共69页，星期日，2025年，2月5日9．神经及神经内分泌肿瘤及其标记物：（１）胶质纤维酸性蛋白（Glialfibrillaryacidicprotein,ＧＦＡＰ）：胶质细胞、室管膜细胞；（２）髓鞘碱性蛋白（ＭＢＰ）：少突胶质细胞；（３）神经细胞烯醇化酶（Neurunspecificenolosa,ＮＳＥ）：神经细胞；（４）神经微丝（Neurofilaments,ＮＦ）神经细胞、嗜铬细胞、副节细胞、ＡＰＵＤ瘤；（５）嗜铬素Ａ（ChromograninＡ）：神经内分泌肿瘤。（６）其它：ＡＣＴＨ、Calcitotin、Gastrin、Glucagon、hGH、Insulin、Serotonin等。第31页，共69页，星期日，2025年，2月5日免疫组织化学最突出的优点：能在原位确定组织及细胞结构的化学成分。深入---------原位分子杂交和免疫电镜。第32页，共69页，星期日，2025年，2月5日电子显微镜技术电子显微镜（electronmicrosocope）简称电镜，是以电子束为照明源，通过电子流对生物样品的透射以及电磁透镜的多级放大后的荧光屏上成像的大型精密仪器。按工作原理和用途的不同可分为透射式电镜（transmissionelectronmicroscope,TEM）和扫描式电镜（scanningelectronmicroscope,SEM）二种基本类型。第33页，共69页，星期日，2025年，2月5日图白藜芦醇处理Jurkat细胞超微结构第34页，共69页，星期日，2025年，2月5日一．透射式电镜主要用于观察细胞内部的微细结构，由于电子的穿透力较弱，故用于透射电镜观察的标本必须切成50~100nm的超薄切片。换句话说，一个细胞要被切成100~200个薄片才适于在透射电镜下观察。样品在被超薄切片之前，一般要经过固定、脱水和包埋等处理，在切片之后还要经过染色等处理才能进行观察。第35页，共69页，星期日，2025年，2月5日超薄切片术（techniquesofultrathinsection）是最基本的电镜样品制备技术，其基本过程同石蜡切片大体相似，包括取材、固定、漂洗、脱水、渗透与聚合、切片和染色等多个环节，但操作过程比石蜡切片更为细致与复杂。为了获得理想的超薄切片，操作者必须认真对待每一步骤，任何环节的疏忽都可能导致制样的失败。第36页，共69页，星期日，2025年，2月5日合格的超薄切片样品应该达到以下基本要求：（1）切片的厚度应在50nm左右，不能超过100nm，以获得较高的分辨率和较高的反差；（2）切片应能耐受电子束的强烈照射而不发生破裂、变形；（3）细胞超微结构保持良好，没有明显的物质凝聚和丢失。第37页，共69页，星期日，2025年，2月5日电子显微镜技术：细胞内的细胞器、细胞骨架或大分子水平的变化。细胞内的病毒颗粒等。肿瘤鉴别诊断病毒包涵体肾炎的分型第38页，共69页，星期日，2025年，2月5日二．扫描电镜扫描电子显微镜就是用聚得很细的电子束流照射要检测的样品表面。由于电子束与样品的相互作用产生各种信息然后通过不同的检测器接收相应的信息，经过处理后显示出样品的各种特征。扫描电镜具有以下特点：能够直接观察样品的表面的结构；样品制备过程简单，不用切成超薄切片；可以从各种角度对样品进行观察；景深大，图像富有立体感；图像的放大范围广，分辨率也比较高；电子束对样品的损伤与污染程度较小；在观察形貌的同时，还可利用从样品发出的其他信号作微区成分分析。第39页，共69页，星期日，2025年，2月5日扫描电镜：血管破裂第40页，共69页，星期日，2025年，2月5日扫描电镜：小肠微绒毛第41页，共69页，星期日，2025年，2月5日第42页，共69页，星期日，2025年，2