芦笋废弃物低聚糖的提纯及对小鼠结肠炎损伤的调节作用.pdf

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哈尔滨工业大学工学硕士学位论文

摘要

芦笋(AsparagusofficinalisLinn)是一种药食兼用的保健型蔬菜,富含多

种营养活性成分。因为其可食用部分少,有很多同样富含各种生物活性成分的

芦笋秸秆和笋皮被当作废料扔掉,其中芦笋废弃物中富含低聚糖,功能性低聚

糖可以进入消化道改善肠道菌群,促进肠道健康。

本文以四川巴中芦笋废弃物为原料,选择超声波辅助热水浸提法提取和纤

维素柱分离得到芦笋低聚糖的三个组分(AOS1、AOS2和AOS3),利用细胞

实验筛选得到抗炎效果较好的组分AOS1选择葡聚糖凝胶柱G-15进行进一步

纯化得到ASPO,通过HPLC、FT-IR、NMR等进行结构表征,结果显示其分子

量为670Da左右,主要由果糖聚合而成含有少量的甘露糖和葡萄糖结果显示

ASPO是分子量约为670Da的果聚糖,主要由果糖组成,并含有少量的甘露糖

和葡萄糖,其结构重复单元为→1)-β-D-Fruf-(2→1)-β-D-Fruf-(2→。

选用巨噬细胞RAW264.7对纯化的芦笋低聚糖(ASPO)进行抗炎实验研

究,以脂多糖LPS作为炎性刺激物刺激细胞产生炎症,检测不同浓度的ASPO

对巨噬细胞炎性指标的影响。通过分析ASPO对NO、活性氧ROS、肿瘤坏死

因子TNF-α、结肠白细胞介素IL-6和IL-1β分泌水平的影响,我们发现高剂

量的ASPO可以显著降低NO、IL-1β、TNF-α和IL-6的分泌水平(P<0.05),

说明芦笋低聚糖可以改善LPS造成的炎性反应。

建立以葡聚糖硫酸钠DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠模型,给予不同浓度的

ASPO,通过对各组小鼠生理生化指标的分析,结果显示ASPO显著降低炎性因

子的含量(P<0.01),缓解结肠炎的病理特征。对肠道进行肠道菌群分析,发

现在门水平上被给予ASPO的小鼠可以改善DSS导致的厚壁杆菌门、拟杆菌门

和变形菌门比例紊乱的情况,使其占比和正常组接近,能够调节肠道菌群,说

明ASPO对DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠的肠道损伤具有一定的调节作用。并

同时把全营养特医食品粉组和加入ASPO的全营养特医食品粉组做显著性分析,

结果表明全营养特医食品粉中加入ASPO可以增强其对结肠炎的小鼠的肠道损

伤的调节作用。本研究旨在为ASPO特医配方粉的研发提供理论基础,提高芦

笋废弃物的利用价值,达到减少资源浪费的目的。

关键词:芦笋低聚糖;纯化;结构解析;结肠炎;特医食品

-I-

哈尔滨工业大学工学硕士学位论文

Abstract

AsparagusofficinalisLinnisamedicinalandnutritionalvegetablethatisrich

inavarietyofnutritionalactivities.Becauseofthesmallamountofedibleparts,

manyofthestalksandskins,whicharealsorichinvariousbioactivecomponents,

arediscardedaswaste,includingasparaguswastewhichisrichin

oligosaccharides.Functionaloligosaccharidesthatenterthedigestivetracttoimprove

intestinalfloraandpromoteintestinalhealth.

Inthispaper,threefractionsofasparagusoligosaccharides(AOS1,AOS2and

AOS3)wereidentifiedb

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