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ICS67.080
B31
T/GDSMM
广东省种子协会团体标准
T/GDSMMXXX-2020
乐昌香芋组培种苗生产技术规程
TechnicalSpecificationforSeedlingProductionofLechangtaroTissueCulture
(征求意见稿)
2020xxxx
年月日发布2020年xx月xx日实施
广东省种子协会发布
T/GDSMMXXX-2020
乐昌香芋组培种苗生产技术规程
1范围
本标准规定了乐昌香芋组织培养过程中的术语和定义、培养基制备、组培室消毒灭菌、抱子组培苗
生产等方面的技术规程。
本标准适用于乐昌香芋组织培养繁殖苗木。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
DB15/T1939—2020文冠果组织培养育苗技术规程
NY/T391绿色食品产地环境质量
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1外植体explant
植物组织培养中作为离体培养材料的器官或组织的片段。外植体通常选择生长健壮的无病虫的植株
上的正常器官或组织。
3.2接种inoculation
在无菌条件下将表面灭菌后的外植体或继代、生根组培材料接入培养基的过程。
4培养基配制
4.1培养基配方
MS培养基:具体成分见附录A中的表A.1。
制备用于不定芽诱导的培养基,配方为:在所述MS培养基上添加6-苄氨基嘌呤(6-BA)和萘乙
酸(NAA);在不定芽诱导培养基中6-苄氨基嘌呤(6-BA)的浓度为1.0mg/L,萘乙酸(NAA)的浓
度为0.2mg/L。
制备用于继代增殖的培养基,配方为:在所述MS培养基的基础上添加6-苄氨基嘌呤(6-BA)和
萘乙酸(NAA),在继代增殖培养基中6-苄氨基嘌呤(6-BA)的浓度为1-3.0mg/L,萘乙酸(NAA)
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T/GDSMMXXX-2020
的浓度为0.2mg/L。
制备用于无菌生根的培养基,配方为:在所述MS培养基的基础上添加吲哚丁酸(IBA)
和萘乙酸(NAA),在生根培养基中吲哚丁酸(IBA)的浓度为0.2mg/L,萘乙酸(NAA)的浓度为
1mg/L。
4.1培养基母液及培养基配制
按照DB15/T1939—2020执行。
4.2环境与器具消毒灭菌
按照DB15/T1939—2020执行。
5组织培养技术
5.1外植体及其消毒
选取生长健康的乐昌香芋幼嫩的球茎作为外植体,用中性洗涤剂洗涤球茎,以去除表面的污垢,然
后去除多余的叶片,干净纸巾吸干表面水分,在超净工作台上,先用70%酒精浸泡30s,再用无菌水冲
洗3次,每次3min。
立即转入0.1%的升汞溶液中消毒8-12min,最后用无菌水洗涤3-5次,每次5min,得到消毒外植
体。
5.2不定芽诱导
在超净工作台内,将消毒外植体切割成0.4×0.5cm的单芽,然后将茎段接种于用于不定芽诱导的
培养基;每瓶接1个外植体,分布均匀,封好瓶口后,注明品种代号、接种人员及日期等,放至培养室
培养,诱导培养18-22d,得到乐昌香芋不定芽。
诱导培养条件如下:温度为26±3℃,湿度为80-90%,光照时间为14h/d,光照强度为800-12001x。
5.3继代增殖
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