团体标准征求意见稿-乐昌香芋组培苗技术规程.pdf

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ICS67.080

B31

T/GDSMM

广东省种子协会团体标准

T/GDSMMXXX-2020

乐昌香芋组培种苗生产技术规程

TechnicalSpecificationforSeedlingProductionofLechangtaroTissueCulture

(征求意见稿)

2020xxxx

年月日发布2020年xx月xx日实施

广东省种子协会发布

T/GDSMMXXX-2020

乐昌香芋组培种苗生产技术规程

1范围

本标准规定了乐昌香芋组织培养过程中的术语和定义、培养基制备、组培室消毒灭菌、抱子组培苗

生产等方面的技术规程。

本标准适用于乐昌香芋组织培养繁殖苗木。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

DB15/T1939—2020文冠果组织培养育苗技术规程

NY/T391绿色食品产地环境质量

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1外植体explant

植物组织培养中作为离体培养材料的器官或组织的片段。外植体通常选择生长健壮的无病虫的植株

上的正常器官或组织。

3.2接种inoculation

在无菌条件下将表面灭菌后的外植体或继代、生根组培材料接入培养基的过程。

4培养基配制

4.1培养基配方

MS培养基:具体成分见附录A中的表A.1。

制备用于不定芽诱导的培养基,配方为:在所述MS培养基上添加6-苄氨基嘌呤(6-BA)和萘乙

酸(NAA);在不定芽诱导培养基中6-苄氨基嘌呤(6-BA)的浓度为1.0mg/L,萘乙酸(NAA)的浓

度为0.2mg/L。

制备用于继代增殖的培养基,配方为:在所述MS培养基的基础上添加6-苄氨基嘌呤(6-BA)和

萘乙酸(NAA),在继代增殖培养基中6-苄氨基嘌呤(6-BA)的浓度为1-3.0mg/L,萘乙酸(NAA)

1

T/GDSMMXXX-2020

的浓度为0.2mg/L。

制备用于无菌生根的培养基,配方为:在所述MS培养基的基础上添加吲哚丁酸(IBA)

和萘乙酸(NAA),在生根培养基中吲哚丁酸(IBA)的浓度为0.2mg/L,萘乙酸(NAA)的浓度为

1mg/L。

4.1培养基母液及培养基配制

按照DB15/T1939—2020执行。

4.2环境与器具消毒灭菌

按照DB15/T1939—2020执行。

5组织培养技术

5.1外植体及其消毒

选取生长健康的乐昌香芋幼嫩的球茎作为外植体,用中性洗涤剂洗涤球茎,以去除表面的污垢,然

后去除多余的叶片,干净纸巾吸干表面水分,在超净工作台上,先用70%酒精浸泡30s,再用无菌水冲

洗3次,每次3min。

立即转入0.1%的升汞溶液中消毒8-12min,最后用无菌水洗涤3-5次,每次5min,得到消毒外植

体。

5.2不定芽诱导

在超净工作台内,将消毒外植体切割成0.4×0.5cm的单芽,然后将茎段接种于用于不定芽诱导的

培养基;每瓶接1个外植体,分布均匀,封好瓶口后,注明品种代号、接种人员及日期等,放至培养室

培养,诱导培养18-22d,得到乐昌香芋不定芽。

诱导培养条件如下:温度为26±3℃,湿度为80-90%,光照时间为14h/d,光照强度为800-12001x。

5.3继代增殖

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