药物分析第十一章抗生素类药物的分析.pptVIP

第1页，共33页，星期日，2025年，2月5日一、概述1.抗生素（antibiotics）：在低微浓度下即可对某些生物（病原微生物）的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称2.分类β–内酰胺类氨基糖苷类四环素类大环内酯类多烯大环类多肽类第2页，共33页，星期日，2025年，2月5日3.来源：生物合成（发酵）化学合成或半合成4.抗生素的特点：化学纯度较低活性组分易发生变异稳定性差生产工艺复杂发酵过程不易控制易受污染第3页，共33页，星期日，2025年，2月5日5.抗生素质量分析采用生物学法与物理化学法鉴别：理化方法、微生物法检查：水分、pH值、异常毒性、热原、细菌内毒素、降压物质等含量/效价测定：微生物法：与临床疗效吻合,灵敏度高；但操作复杂费时理化方法：准确度与专属性较高,且操作简便；但与临床疗效有偏差第4页，共33页，星期日，2025年，2月5日二、β–内酰胺类包括青霉素类和头孢菌素类1.化学结构：青霉素类：6-APA为母核头孢菌素类：7-ACA为母核*****第5页，共33页，星期日，2025年，2月5日2.主要理化性质：1）酸性（羧基）：pKa2.5-2.8酸性较强与碱金属成盐后水溶性好2）UV（共轭）：青霉素类：苯环取代基头孢菌素类：母核有共轭结构第6页，共33页，星期日，2025年，2月5日3）旋光性：有多个手性碳4）稳定性（内酰胺）：干燥条件较稳定，溶液不稳定青霉素降解、失效氧化剂、酸、碱酶、金属离子、Δ第7页，共33页，星期日，2025年，2月5日3.鉴别1）羟肟酸铁反应：β–内酰胺类羟肟酸显色2）茚三酮反应α-氨基蓝紫色3）双缩脲反应β–内酰胺类紫色4）光谱法（UV、NMR）5）色谱法（HPLC、TLC）NH2OH·HClNaOHFe3+H+茚三酮Δ碱性酒石酸铜呈色反应第8页，共33页，星期日，2025年，2月5日头孢利定的NMR鉴别法(JP14)取本品50mg溶于0.5ml重水中，测定NMR光谱时，应显示δ3.8附近δ6.9～7.5δ7.9～9.0单峰信号多重峰信号多重峰信号2：3：5强度比第9页，共33页，星期日，2025年，2月5日头孢氨苄鉴别的TLC条件ChP(2000)5mg/ml2μl硅胶G0.1mol/L枸橼酸液-0.2mol/LNa2HPO4-丙酮(120:80:3)；0.1%茚三酮溶液显色USP(24)25mg/ml5μl硅胶醋酸乙酯-水-乙腈-冰HAc(48:18:14:14)；短波长UV光检出BP(1999)0.4%(W/V)1μl硅烷化硅胶HF25415.4%NH4Ac(pH6.2)-丙酮(85:15)；254nm检出第10页，共33页，星期日，2025年，2月5日4.特殊杂质检查聚合物、有关物质、异构体等头孢他啶中聚合物测定色谱条件与系统适用性试验用葡聚糖凝胶G-10（40～120?m）为填充剂，玻璃柱内径1.3～1.5cm，床体积50～60ml；流动相A为含3.5%硫酸铵的0.01mol/L磷酸盐缓冲液（取磷酸氢二钠2.19g和磷酸二氢钠0.54g，加水1000ml使溶解，调节pH至7.0），流动相B为0.01%十二烷基硫酸钠溶液；流速为每分钟1ml；检测波长为254nm。以流动相A为流动相，用1mg/ml蓝色葡聚糖2000溶液进样200?l进行测定，理论板数应不低于900，拖尾因子在0.75～1.5，对照品溶液以流动相B为流动相，重复进样200?l，峰面积值的相对标准差应小于5.0%第11页，共33页，星期日，2025年，2月5日对照品溶液的制备：取头孢他啶对照品适量，精密称定，加水制成每1ml中含头孢他啶100?g的溶液，摇匀测定法取本品适量，精密称定，加水制成每1ml中约含头孢他啶20mg的溶液，立即进样200?l，以流动相A为流动相进行测定，记录色谱图；另取对