金属修饰的碳基固相萃取吸附...中血红蛋白的选择性分离富集.pdf

目录

第1章绪论1

1.1样品前处理技术1

1.1.1样品前处理概述1

1.1.2样品前处理方法的分类1

1.1.3固相萃取技术概述7

1.1.4固相萃取吸附剂10

1.2金属亲和技术13

1.2.1金属亲和技术概述13

1.2.2金属亲和技术的应用14

1.3血红蛋白15

1.3.1血红蛋白的结构与作用15

1.3.2血红蛋白的检测方法16

1.4论文选题及研究内容16

第2章金属有机骨架修饰的碳基分子印迹聚合物对牛血红蛋白的选

择性分离富集18

2.1引言18

2.2实验部分19

2.2.1仪器与试剂19

2.2.2C@GI@Cu-MOFs@MIPs吸附剂的制备20

2.2.3吸附实验21

2.2.4实际样品的制备22

2.3结果与讨论22

2.3.1吸附剂的表征22

2.3.2合成条件优化23

2.3.3SPE条件的优化24

2.3.4选择性实验25

2.3.5吸附平衡实验和吸附动力学实验26

2.3.6对比研究31

2.3.7吸附剂的可重用性和再现性31

2.4实际样品分析32

2.5本章小结32

第3章氨基酸改性Cu2+固定化碳基吸附剂对牛血红蛋白的选择性分

离与富集33

3.1引言33

3.2实验部分34

3.2.1仪器与试剂34

3.2.2C@TA@P@A-Cu吸附剂的制备35

3.2.3静态吸附实验36

3.2.4实际样品分析37

3.3结果与讨论37

3.3.1C@TA@P@A-Cu吸附剂的表征37

3.3.2合成条件优化40

3.3.3SPE条件的优化40

3.3.4动力学实验42

3.3.5选择性实验48

3.3.6吸附剂的重现性和重复利用性49

3.3.7对比研究49

3.4实际样品分析51

3.5本章小结51

结论52

参考文献53

摘要

摘要

血红蛋白（Hb）一种富含组氨酸的蛋白质，在许多生理活动中起着至关重要

的作用。Hb作为一种含铁转运蛋白，在生物体内转运氧气和二氧化碳。Hb含量

关系到生物体的健康，其含量失衡会导致各种疾病，如贫血、白血病、糖尿病和

心脏病。因此，准确测定Hb含量对临床病理分析至关重要。由于牛血红蛋白

（Bovinehemoglobin,BHb）与Hb具有很高的相似性，同时BHb具有较好的携氧

能力，且有较多的组氨酸残基暴露在BHb表面，易获得且成本低。因此，在富组

氨酸蛋白的初步研究中，可用BHb代替Hb来获得更明显的效果，BHb成为了

Hb的理想替代品。因此需要开发一种在复杂生物样品中分离和富集BHb的有效

方法。本工作基于固相萃取技术制备了两种新型纳米材料，研究了两种材料对于

BHb的选择性识别和分离机理，具体研究内容包括以下两部分：

1.制备了一种碳基Cu2+固定化金属有机框架修饰的分子印迹

（C@GI@Cu-MOFs@MIPs）吸附剂。以碳纳米粒子为载体，BHb为模板分子，

对BHb进行选择性分离富集。本文系统地研究了样品浓度、样品pH值、离子强

度和洗脱剂类型对所制备的吸附剂吸附性能的影响。实验证明，该吸附剂在经过

6次吸附-解吸循环后仍可重复使用，其活性没有明显下降。此外，

C@GI@Cu-MOFs@MIPs对BHb具有良好的结合行为，结合速度快（45min），

−1

吸附量高（1051.1