重组DNA技术的基本工具课件高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

第3章基因工程

第1节

重组DNA技术的基本工具

【本节聚焦】

1、重组DNA技术所需的三种基本工具是什么?它们的作用分别是什么?

2、基因工程载体需要具备什么条件?;

情境导入

我国是棉花的生产和消费大国，但棉花种

植中易受虫害，其中以棉铃虫最为主，可以使棉

花产量减少三分之一，甚至绝收。若使用农药

苏云金杆菌中存在一种毒

不仅会提高生产成本，还会造成农产品和环境污蛋白基因(Bt基因),编码沈出的毒蛋白能杀死害虫。

思考：如何培育出自身就能抵抗虫害的棉花呢?;

基因工程是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生

物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和

生物产品。从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作重组DNA技术。;

一、基因工程的理论基础

【问题1】为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内表达?

①基因是控制生物性状的独立遗传单位。

②遗传信息的传递都遵循中心法则。;

【问题2】为什么不同生物的DNA分子能拼接起来?

①DNA分子的基本组成单位相同，都是4种脱氧核苷酸；

②空间结构相同，都是规则的双螺旋结构。

③都遵循碱基互补配对原则;

如何获得抗虫棉?需要什么工具?

思考：DNA双螺旋的直径只有2nm,对如此微小的分子进行操作，是一项非常精细的工作，更需要专门的“分子工具”。;

噬菌体侵染细菌的电子显微镜图片

1、病毒入侵真核生物会被免疫系统攻击，细菌面对噬菌体时如何自保?

细菌能产生限制性内切核酸酶，切割外源DNA,从而达到保护自身的目的(防

御机制)

2、如何理解限制性内切核酸酶命名的由来?

①限制外源DNA的扩散

②“内切”表明酶在DNA链内部切割(而非从末端开始)

③作用于核酸，限制酶特指切割DNA的酶。;

二、限制性内切核酸酶(限制酶)

3、为什么限制性内切核酸酶不剪切细菌本身的DNA?

甲基一限制酶的识别序列

(被甲基化修饰)

细菌A

—限制酶A;

用生物属名的头一个字母与种加词的头两个字母，组成了3个字母的略语，以此来???示这个酶是从哪种生物中分离出来的(p72)。

例如，一种限制酶是从大肠杆菌(Escherichiacoli)的R型菌株分离来的，就用字母EcoR表示；如果它是从大肠杆菌R型菌株中分离出来的第一种限制酶，则进一步表示成EcoRI。;

二、限制性内切核酸酶(限制酶)

(5)作用特点：酶的专一性能够识别双链DNA分子_的特定脱氧核苷酸序列，并使每一条链中特定部位磁酸二酯键断开。;

二、限制性内切核酸酶(限制酶)

(6)限制酶的识别序列：

四种限制酶识别的特定序列有何特点?

①大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸

组成，也有少数限制酶的识别序列由4个、8个或

其他数量的核苷酸组成。

②都可以找到一条中心轴线；

③中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称、重复排列的，称为回文序列。;

黏性未端

DNA两条单链的切口处，伸出几个核苷酸，刚好能互补配对，

这样的切口叫黏性末端。;

1、不同来源DNA用同种限制酶切割产生的黏性末

端是否相同?相同。酶具有专一性，识别的序列相同

2、不夙限制酶切割产生的黏性末端是否一定不BglⅡ;

CTTAAGGTTAACCAATTG5

限制酶的识别位点沿中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称、重复排列的，称为回文序列。

3、请结合图示，推断限制酶切割一次可断开几个磷酸二酯键?

产生多少个游离的磷酸基团?产生几个黏性末端?消耗几分子水?3;

苏云金芽孢杆菌DNA片段中的部分基因

EcoRI识别5-GAATTC-3序列，并在G与A之间切割。;

1.概念：将两个双链DNA片段“连接”起来的酶

2.作用：将两个DNA片段连接起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。;

AAITC

TTAA

55

5

E.coliDNA连

接酶

3

T

5;

游离的核苷酸

前导链

解旋酶

后随链

复制叉

DNA聚合酶;;

a:磷酸二酯键；b:氢键

A.切断a处的酶为_①

B.连接a处的酶为③④

C.切