工业微生物及来源.pptxVIP

内容模块一工业微生物及来源、分离、选育1.生物活性物质产生菌的筛选；2.寻找产生目标或所需生物活性物质的微生物（菌种）：确定其来源；3.新种的分离：把混杂的各类微生物单个分开。原则：根据生产实际要求和菌种特性，灵活地、有的放矢地采用各种筛选方法，快速、准确地把所需的菌种挑选出来：获得纯种。

模块一工业微生物及来源、分离、选育01生产菌种的获得；02育种或选育；

一、生物活性物质产生菌的筛选稀释纯种分离划线采样预处理增殖或富集培养般新种分离纯化和筛选步骤性能测定组织分离初筛复筛

一、生物活性物质产生菌的筛选2.产生目标或所需生物活性物质的微生物（菌种）的来源土壤、海洋、空气、某些特定的环境

二、微生物选择型分离的原理1.2施加选择性压力分离法；抗生素或试剂；（P32）环境条件：温度、pH、渗透压、氧气等；碳源、氮源（培养基）；（P32）1.1预处理；（P31）新种的分离

1.3随机分离法；（P35）培养方法：分批式富集培养（摇瓶培养），恒化式富集培养（连续培养）（P34）抗生素产生菌的筛选；药理活性化合物(酶抑制剂)的筛选；生长因子产生菌的筛选；上述两种方法的目的是富集和增殖，使所需微生物在混合物中形成优势，已达到某种程度的初筛效果，便于后续纯种分离。二、微生物选择型分离的原理

二、微生物选择型分离的原理粗放，只能达到“菌落纯”（工业上常采用）纯种分离方法：稀释分离法、划线法、组织法。01或“细胞纯”的水平。可达到“菌株纯”或“细胞纯”的水平。需采用专门的仪器设备，复杂：显微操作装置，简单：利用培养皿或凹玻片作分离小室进行分离。另一类是较细的单细胞或单孢子分离方法，可达到“菌株纯”02

二、微生物选择型分离的原理分离时为提高筛选工作效率，仍要引入各种选择性压力。对纯种进行发酵条件的摸索和生产试验（生产性能测定）。此处可加一步产物鉴别此步骤要反复进行，直至获得1~3株较好的、适合生产要求的菌株，并进而将其作为育种的出发菌株。

二、微生物选择型分离的原理（1）生产性能测定分初筛和复筛两步进行。（2）初筛阶段的主要矛盾：菌株多，工作量大；准确性是次要矛盾。（3）初筛原则：多选菌株，一个菌株做一个发酵。（4）复筛阶段：80~90%的菌株在初筛阶段被淘汰，生产性能和准确性为主要矛盾。5）复筛原则：一个菌株同时做3~5个发酵，必要时可连做几批。应把握工作量和准确性这对矛盾的“度”。

三、菌种选育1.出发菌株的选择原则自然界新分离的野生型菌株，对诱变处理较敏感，容易达到好的效果；在生产中经生产选种得到的菌株与野生型较相像，也是良好的出发菌株；三要素：出发菌株、育种手段、筛选条件。改造菌种，目的：大幅度提高产量，改进质量。

每次诱变处理都有一定提高的菌株，往往多次诱变能积累较多的提高；单击此处添加小标题出发菌株开始时可以同时选2～3株，在处理比较后，将更适合的出发菌株留作继续诱变；单击此处添加小标题要尽量选择单倍体细胞、单核或核少的多细胞体来作出发诱变细胞，这是由于变异性状大部分是隐性的，特别是高产基因。单击此处添加小标题

单击此处添加小标题自然选育（P36）单击此处添加小标题杂交育种（P43~48）单击此处添加小标题工业菌种育种的手段：单击此处添加小标题诱变育种（P37~41）单击此处添加小标题原生质体融合（P48）单击此处添加小标题基因工程育种（P58）

诱变育种举例-营养缺陷型SM：在基本培养基中加入相应的营养成分的称补充培养。如牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基等。CM：能满足各种营养缺陷型生长的称完全培养基。01与营养缺陷型对应的是野生型。是指通过诱变而产生的缺乏合成某些营养物质如氨基酸、维生素和碱基等的能力，必须在其基本培养基中加入相应的营养成分才能正常生长的变异株。MM：能满足野生型菌株正常生长的培养基称基本培养基。02

诱变育种举例-营养缺陷型筛选营养缺陷型的步骤诱变淘汰野生型检出缺陷型确定生长谱诱变方法：物理诱变和化学诱变。

诱变育种举例-营养缺陷型2、淘汰野生型目的：浓缩缺陷型。采用的手段或方法：野生型MM而缺陷型MM①抗生素法：将诱变处理液在MM中培养短时让野生型生长，处于活化阶段，而缺陷型无法生长，处于休眠状态。

诱变育种举例-营养缺陷型01细菌可以采用青霉素，酵母可采用制霉菌素。05细菌或酵母对一些抗生素敏感，加入一定量的抗生素，使活化状态的野生型就被杀死，缺陷型因因不能生长繁殖而保存下来。03对于丝状菌，在MM上会形成菌丝体，就不能通过过滤介质，而缺陷型因未生长而能通过滤层。02菌丝过滤法：适合丝状菌04能否浓缩的关键是细胞在MM中生长的情况。

诱变育种举例-营养缺陷