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《微生物学检验》国家卫生和计划生育委员会规划教材国家卫生和计划生育委员会规划教材微生物学检验微生物学检验第1页，共26页，星期日，2025年，2月5日第2页，共26页，星期日，2025年，2月5日第十四章

真菌检验技术返回总目录第3页，共26页，星期日，2025年，2月5日本章内容第一节真菌形态检验技术1第二节真菌培养技术2第三节真菌的鉴定方法3第四节真菌药物敏感试验4第4页，共26页，星期日，2025年，2月5日学习目标及重点学习目标：掌握真菌的检验方法熟悉真菌标本采集及注意事项；真菌的鉴定程序；真菌药物敏感试验方法了解常用抗真菌药物本章重点：★临床真菌标本的采集和处理★真菌的形态学检查、培养技术和鉴定试验★真菌药物敏感试验第5页，共26页，星期日，2025年，2月5日第一节真菌形态检验技术一、标本的采集和处理1.标本的采集——根据真菌感染部位采集不同的标本取毛发、皮屑、指（趾）甲等标本取痰液、脓汁、血液、脑脊液等标本深部真菌感染浅部真菌感染第6页，共26页，星期日，2025年，2月5日标本来源要适宜用药前采集标本严格无菌操作标本量要充足立即送检2.标本采集注意事项第一节真菌形态检验技术第7页，共26页，星期日，2025年，2月5日临床标本分离培养直接检查免疫学检查观察菌落生化反应染色镜检直接镜检3.检验程序核酸检测其他鉴定试验形态学检查病理组织标本动物实验镜检PASHE第一节真菌形态检验技术第8页，共26页，星期日，2025年，2月5日二、直接镜检标本处理液：（1）KOH溶液适于检查致密的难以透明的材料（2）生理盐水用于观察真菌的出芽现象（3）水合氯醛-石炭酸-乳酸封固液透明力较强，只限于不透明的标本镜检（加温）毛发或皮屑等注意真菌与其他混杂物的鉴别标本+标本处理液第一节真菌形态检验技术第9页，共26页，星期日，2025年，2月5日三、染色镜检革兰染色：各种真菌均为革兰阳性（图1）乳酸酚棉蓝染色：染成蓝色（图2）墨汁染色：背景染成黑色，菌体不着色（图3）荧光染色：荧光显微镜下发出荧光糖原染色：多糖成分呈红色，核为蓝色，背景为淡绿色返回章内容（图1）（图3）（图2）第一节真菌形态检验技术第10页，共26页，星期日，2025年，2月5日第二节真菌培养技术一、基本条件1.常用工具平皿、试管、接种针、接种环、接种钩、培养箱等第11页，共26页，星期日，2025年，2月5日一、基本条件2.培养基真菌营养要求不高，最适pH4.0～6.0常用的培养基:培养基名称培养基用途沙氏培养基真菌的常规培养放线菌酮-氯霉素琼脂真菌的常规培养玉米粉吐温-80琼脂观察白假丝酵母菌的厚膜孢子马铃薯葡萄糖琼脂观察真菌菌落色素，用于鉴别尿素琼脂生化反应鉴别培养（红色癣菌和石膏样癣菌）心脑浸液葡萄糖血琼脂显色鉴定培养基深部真菌培养真菌的培养与鉴定第二节真菌培养技术第12页，共26页，星期日，2025年，2月5日显色鉴定培养基真菌特异性酶的底物（无色）产色基团代谢基质产色基团游离（显色）真菌的酶分解代谢基质原理第二节真菌培养技术第13页，共26页，星期日，2025年，2月5日白色念珠菌：热带念珠菌：克柔念珠菌：光滑念珠菌：近平滑念珠菌：蓝绿色蓝灰色、铁蓝色粉红色紫色白色?第二节真菌培养技术第14页，共26页，星期日，2025年，2月5日二、培养方法仅用于培养生长繁殖较快的真菌观察真菌结构及生长发育过程多用于菌种传代接种与保存试管培养法大培养法小培养法玻璃棒载玻片培养基盖玻片无菌蒸馏水第二节真菌培养技术第15页，共26页，星期日，2025年，2月5日三、生长现象类酵母型菌落丝状菌落观察菌落生长速度、菌落大小、表面形态、性质、颜色、边缘、底部等酵母型菌落返回章内容第二节真菌培养技术第16页，共26页，星期日，2025年，2月5日检测真菌对单糖、多糖、醇类等发酵情况糖（醇）类发酵试验检测真菌对糖类中的碳源利用能力的试验，主要用于鉴定酵母菌同化碳源试验检测真菌对氮源利用能力的试验，主要用于鉴定酵母菌同化氮源试验某些真菌具有明胶酶，可分解明胶蛋白，使其失去凝胶性质而不能凝固明胶液化试验某些真菌具有尿素酶，可分解尿素尿素分解试验一、常