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研究论文

昆虫病原线虫防虫效果测定及抗干燥基因功能验证

第一章前言7

1.1昆虫病原线虫7

1.1.1昆虫病原线虫的生活史7

1.1.2昆虫病原线虫的致病机理7

1.1.3昆虫病原线虫的应用现状7

1.2昆虫病原线虫环境适应性研究7

1.3昆虫病原线虫对斜纹夜蛾的防控8

1.3.1斜纹夜蛾的生物学特性9

1.3.2斜纹夜蛾的危害与防控9

1.4昆虫病原线虫对甘薯蚁象的防控10

1.4.1甘薯蚁象的危害11

1.4.2甘薯蚁象的防治11

1.5昆虫病原线虫对桃红颈天牛的防控11

1.5.1桃红颈天牛的生物学特性11

1.5.2桃红颈天牛的危害特点11

1.5.3桃红颈天牛防治技术11

1.6昆虫病原线虫施用技术12

1.7研究目的及意义13

第二章材料与方法13

（一）昆虫病原线虫对不同昆虫的防效测定14

1昆虫病原线虫对甘薯蚁象的防效测定14

1.1供试线虫14

1.2供试昆虫14

1.3生物测定14

2昆虫病原线虫对斜纹夜蛾的防效测定15

2.1供试线虫15

2.2供试昆虫15

2.3生物测定15

3昆虫病原线虫对桃红颈天牛的防效测定15

3.1供试线虫16

3.2供试昆虫16

3.3生物测定16

3.3.1昆虫病原线虫对桃红颈天牛幼虫室内防效测定16

3.3.2昆虫病原线虫对桃红颈天牛幼虫田间防效测定16

（二）田间应用滴灌系统施用昆虫病原线虫16

1不同化学药剂对昆虫病原线虫的影响16

1.1供试昆虫和线虫种类16

1.2试验药剂16

1.3试验方法17

2不同肥料对昆虫病原线虫的影响17

2.1供试昆虫和线虫种类17

2.2试验药剂17

2.3试验方法18

3滴灌系统对昆虫病原线虫的影响18

3.1供试线虫18

3.2试验材料18

3.3试验方法18

（三）昆虫病原线虫抗干燥基因的功能验证18

1供试线虫19

2试验材料及仪器19

3试验方法20

3.1引物设计20

3.2线虫总RNA的提取21

3.3基因PCR扩增23

3.4dsRNA浸泡线虫27

3.5qPCR测定线虫体内基因表达量的变化28

3.6基因沉默后线虫的抗逆性测定29

3.7基因沉默后线虫对大蜡螟的致死率测定29

4数据统计与分析30

第三章结果30

（一）昆虫病原线虫对不同昆虫的防效测定30

1昆虫病原线虫对甘薯蚁象的防效测定30

1.1昆虫病原线虫对甘薯蚁象3龄幼虫的防效测定30

1.2不同剂量线虫对甘薯蚁象成虫的防效测定31

2昆虫病原线虫对斜纹夜蛾的防效测定32

3昆虫病原线虫对桃红颈天牛的防效测定37

3.1昆虫病原线虫对桃红颈天牛防效的防效测定37

3.2昆虫病原线虫对桃红颈天牛田间防效测定37

（二）田间应用滴灌系统施用昆虫病原线虫38

1化学药剂对昆虫病原线虫的影响39

2肥料对昆虫病原线虫的影响47

3药剂处理后对大蜡螟致死率结果检测57

4滴灌系统对昆虫病原线虫的影响59

4.1滴灌时对不同距离线虫流出量的检测59

4.2滴灌后取土检测线虫存活率59

（三）昆虫病原线虫抗干燥基因的功能验证61

1基因克隆及生物信息分析61

1.1RNA提取结果61

1.2基因PCR扩增结果62

1.3生物学分析63