细胞分离等生物工程下游技术.pptVIP

第1页，共36页，星期日，2025年，2月5日第一节发酵液预处理目的：分离菌体和其他悬浮颗粒；除去部分杂质和改变滤液性质发酵液的性质：产物浓度较低悬浮颗粒小固体粒子可压缩性大粘度大性质不稳定第2页，共36页，星期日，2025年，2月5日第一节发酵液预处理常用的发酵液预处理方法：降低液体的粘度：水稀释法、加热法调整pH值凝聚和絮凝凝聚：在电解质作用下，由于胶粒之间双电层电排斥作用降低，从而胶体体系不稳定。絮凝：在某些高分子絮凝剂存在下，基于桥架作用，使胶粒形成较大絮凝团的过程。混凝：前两者的复合使用。第3页，共36页，星期日，2025年，2月5日第一节发酵液预处理加入助滤剂助滤剂：不可压缩的多孔微粒。硅藻土、纤维素、石棉粉、珍珠岩等。悬浮液中大量的细微粒子吸附到助滤剂的表面上，其可压缩性下降了，滤饼疏松，过滤阻力降低了。加入不影响目的产物的反应剂第4页，共36页，星期日，2025年，2月5日第二节细胞分离A.重力沉降：细胞体积小，沉降速度很慢使细胞聚集成较大的凝聚颗粒，提高沉降速度高分子絮凝剂：聚丙烯酰胺、聚乙烯酰胺等无机的凝聚剂：中性盐（硫酸铝、氯化钙等）第5页，共36页，星期日，2025年，2月5日细胞分离—B.离心沉降离心分离法：1.差速离心（Differentialcentrifugation）生化工业中最常用的离心分离法，细胞的分离为一级分级分离。实际应用中据实际物系的特点、分离目的和所需分离程度，选择适当的离心机转数和时间，可使料液中不同组分得到分级分离。2.区带离心（Zonalcentrifugation）事先在离心管中用某种低分子溶质调配好密度梯度，再加待处理料液后进行离心。离心时，料液中各组分在密度梯度中以不同的速度沉降，形成各自的区带而得到分离。蔗糖、CsCl、NaBr密度梯度溶液第6页，共36页，星期日，2025年，2月5日细胞分离—B.离心沉降离心分离法：低速离心，高速离心，超速离心过滤式离心，沉降式离心冷冻离心：低温下操作第7页，共36页，星期日，2025年，2月5日细胞分离—B.离心沉降离心分离设备：实验室用离心机：离心管式转子离心机间歇式操作各种形式的离心机转子第8页，共36页，星期日，2025年，2月5日细胞分离—B.离心沉降工业用离心机：可连续操作管式离心机，蝶片式离心机第9页，共36页，星期日，2025年，2月5日管式离心机管式离心机能澄清及分离流体物质，被应用于化学、生物化学、制药、血浆等研究领域。设备简单，分离效率高；但生产能力较小。第10页，共36页，星期日，2025年，2月5日碟式离心机碟式离心机是沉降式离心机中的一种，用于分离难分离的物料（例如粘性液体与细小固体颗粒组成的悬浮液或密度相近的液体组成的乳浊液等）。碟式分离机是应用最广的沉降离心机。碟式离心机可以完成两种操作：(1)液-固分离，称澄清操作；(2)液-液（或液-液-固）分离（即乳浊液的分离），称分离操作。第11页，共36页，星期日，2025年，2月5日细胞分离—C.过滤过滤（Filtration）：利用多孔性介质截留悬浮液中的固体粒子，进行固液分离的方法。Filtrationseparatessolidfromaliquidbyforcingtheliquid?througha?solid?supportorfiltermedium.第12页，共36页，星期日，2025年，2月5日细胞分离—C.过滤通常发酵液的黏度大，其中的微生物体积小，造成过滤的困难Howeverthesmallsizeofmicroorganismsmakefiltrationof?biologicalsolutionsconsiderablymorecomplicated.Generally,fermentationbeersandotherbiologicalsolutionsarehardtofilterbecauseofthehighviscosityorhighlycompressiblecakes.在过滤前，一般需对料液进行絮凝或凝聚等预处理，此外可添加助滤剂提高过滤速度。第13页，共36页，星期日，2025年，2月5日细胞分离—C