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基于iPSC-TM组织再生的内源活性TM的鉴定与功能研究

摘要

青光眼是不可逆的致盲性眼科疾病。Schlemm管（Schlemm`scanal，SC）和小

梁网（trabecularmeshwork，TM）是控制房水外排的关键组织结构，约80%以上的

房水经此排出。小梁网组织中细胞数目减少引发组织功能异常，被认为是造成青光

眼眼内压（intraocularpressure，IOP）升高的主要风险因素。通过降低小梁网-

Schlemm管通路的房水外排阻力来调节眼内压已成为治疗原发性开角型青光眼的有

效方法。我们前期研究结果表明：诱导性多功能干细胞（iPSCs）来源的TM细胞

（iPSC-TM）能够有效重塑青光眼小鼠受损TM组织、改善房水外排、维持IOP的

动态平衡。这主要归因于iPSC-TM与内源性TM细胞互作后，激活内源性TM细

胞，从静止态转变为活跃态，引发内源性TM细胞再增殖，最终重塑受损的小梁网

组织。然而，我们对被激活的内源性TM细胞的了解极其有限，严重限制了青光眼

治疗新方法的研发。

研究目的：本研究旨在鉴定与iPSC-TM互作后被激活的内源性TM细胞；明确

这些细胞在小梁网组织中，随年龄和青光眼病程的变化趋势；初步探讨ABCG2对

眼内压的影响。

研究方法：将诱导性多功能干细胞来源的小梁网样细胞（iPSC-TM）移植到小

鼠眼前房后，利用免疫组织化学方法来寻找和鉴定与iPSC-TM互作的内源性TM细

胞；利用HE染色实验和免疫组织化学实验，对不同年龄的C57BL/6小鼠和Tg-

MYOCY437H青光眼小鼠模型、激光诱导高眼压食蟹猴模型、正常人以及原发性开角

++

型青光眼患者进行研究，初步明确TM-Schlemm管区域ABCG2和NES亚群的变

化趋势；通过小鼠前房注射携带有shRNA-ABCG2序列的慢病毒，敲低TM-

Schlemm管区域ABCG2蛋白，测定眼内压，探讨ABCG2对眼内压的影响。

研究结果：

+++

1.iPSC-TM激活了内源性的ABCG2和NES亚群再增殖，并且ABCG2亚群

具有随移植时间推移而持续增殖的趋势。

2.免疫荧光结果显示，伴随年龄增长，正常C57BL/6小鼠TM-Schlemm区域

++

小梁网细胞数和NES亚群细胞数均减少，而ABCG2亚群细胞数则与之相

反；从HE染色结果可见，伴随年龄增长，Tg-MYOCY437H青光眼小鼠模型

TM细胞逐渐减少，大量色素附着与TM组织上，TM组织严重受损；免疫

荧光结果显示，与C57BL/6小鼠相比，Tg-MYOCY437H青光眼小鼠模型TM-

++

Schlemm管区域小梁网细胞数和NES亚群细胞数减少更为严重，ABCG2

亚群细胞数也显著减少。

+

3.相比正常人，原发性开角型青光眼患者TM-Schlemm管区域ABCG2亚群

细胞数量显著减少，与Tg-MYOCY437H青光眼小鼠模型中该亚群的变化趋势

++

一致；相比于其他物种，食蟹猴中表现出高ABCG2和NES重叠率（即