抗菌药物敏感性试验药敏试验.pptVIP

不合格培养基没有抑菌圈抑菌圈内有菌生长抑菌环直径＜20mm合格培养基培养基上出现边缘清楚的抑菌环直径为20mm或更大第60页，共116页，星期日，2025年，2月5日主要指镁和钙影响氨基糖甙类、多粘菌素和四环素对假单胞菌的试验结果含量过高抑菌圈变小含量过低抑菌圈变大甚至不可接受锌离子主要影响细菌对碳青霉烯的敏感性二价阳离子含量的影响第61页，共116页，星期日，2025年，2月5日培养条件非苛氧菌解释标准的基础是在空气中孵育。某些药物（氨基糖甙类、大环内酯类和四环素）受CO2影响抑菌环直径会有较大改变，非苛氧菌不能在CO2浓度较高的环境中孵育。苛氧菌应在CO2环境孵育中第62页，共116页，星期日，2025年，2月5日纸片的贮存装有纸片的容器应置于非无霜冰箱中，≤8℃冷藏或≤-14℃冷冻至使用前某些不稳定药物（如亚胺培南、头孢克洛、克拉维酸复合药等）也应冷冻保存直至使用当天，以尽量保持其稳定性。第63页，共116页，星期日，2025年，2月5日装有纸片的密封容器应于使用前1-2h移出冰箱，平衡至室温后才能打开以防热空气接触冷纸片时产生冷凝水。装有纸片的塑胶管从密封包装中取出后应置于密封的干燥容器中β-内酰胺类药物纸片应密封包装并冷冻，少量正在使用的纸片可冷藏至少一周第64页，共116页，星期日，2025年，2月5日使用纸片分配器应上紧盖子并配备足量干燥剂，分配器打开前应平衡至室温；指示剂变色时应更换干燥剂以防过于潮湿。装有纸片的分配器不用时应冷藏过期纸片不得使用，应废弃。第65页，共116页，星期日，2025年，2月5日接种物的浊度使用BaSO4浊度标准管或其光学等同物（如乳胶颗粒悬液）相当于0.5号麦氏标准管(配制方法见后）第66页，共116页，星期日，2025年，2月5日使用前将浊度标准管取出置于旋转混匀器上剧烈振动，目测其外观浊度应均匀一致出现大颗粒浊度管应更换每月应更换硫酸钡浊度管或核实其浊度第67页，共116页，星期日，2025年，2月5日0.048mol/L的BaCL20.5mL（1.175%w/vBaCl2·H2O）加入到99.5mL0.18mol/L的H2SO4（1%v/v），并不断搅动以维持混悬状态。0.5号麦氏标准管配制第68页，共116页，星期日，2025年，2月5日按每管4-6mL分装于带螺帽的试管，其口径应与稀释菌所用一致。密封并贮存于室温黑暗处可使用分光光度计核实浊度标准管的浊度，光径1cm，625nm吸光度值0.08-0.10者即为0.5号麦氏标准管。第69页，共116页，星期日，2025年，2月5日注意事项对每种可能致病的细菌进行药敏试验时，使用的单个菌落应选自原始琼脂平板多种不同型细菌的混合物不能在同一药敏试验平皿上进行试验直接用临床标本药敏试验须经分纯菌种药敏试验复核第70页，共116页，星期日，2025年，2月5日接种物浓度避免过浓或过稀禁止用未稀释的过夜肉汤或其他非标准接种物进行平板划线必须应用标准化操作方法并测量抑菌环直径，绝对不允许只凭环的有无而不考虑环的大小判断结果。第71页，共116页，星期日，2025年，2月5日试验方法—稀释法第72页，共116页，星期日，2025年，2月5日琼脂稀释法重复性好同时测定多种细菌可观察被检菌落生长情况、发现污染菌可应用机械化手段、提高效率第73页，共116页，星期日，2025年，2月5日微量肉汤稀释法一块板可以同时测定多种抗菌药物操作规范、简便、结果可信药物不一定适合实际工作需要第74页，共116页，星期日，2025年，2月5日试验方法—Etest第75页，共116页，星期日，2025年，2月5日是一种抗菌药物浓度梯度法直接测量MIC的药敏试验结合了稀释法和扩散法原理、特点并克服两者缺点结果准确、重复性好、操作简便第76页，共116页，星期日，2025年，2月5日原理E试条为5mm*50mm的长条，一面固定有预先制备的稀释度呈指数级连续增长的抗菌药物；另一面有读数和判别刻度。抗菌药物梯度可覆盖20个等倍稀释度试条贴在涂有细菌的琼脂平板上孵育后其周围可见椭圆形抑菌环，边缘与试条交点的刻度称为抑制浓度（IC）。第77页，共116页，星期日，2025年，2月5日方法培养基和菌种同纸片法贴试条确保已接种细菌的平板干燥用镊子将试条刻度面朝上放入使之与琼脂紧密接触药物最高浓度处应靠平板边缘轻压以驱赶其下方气泡孵育时间和环境要求参考说明书第78页，共116页，星期日，2025年，2月5日结果解释无抑菌环