PCR基础理论知识考核试题及答案.docxVIP

PCR基础理论知识考核试题及答案

一、选择题（每题2分，共30分）

1.下列关于PCR技术的叙述，错误的是（）

A.PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术

B.PCR技术的原理是DNA双链复制

C.利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列

D.PCR扩增中必须有解旋酶才能解开双链DNA

答案：D。PCR技术中是通过高温使双链DNA解开，不需要解旋酶，A、B、C选项关于PCR技术的描述均正确。

2.PCR反应中，引物的作用是（）

A.打开DNA双链

B.催化合成DNA子链

C.提供模板

D.使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸

答案：D。引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸，打开DNA双链是通过高温，催化合成DNA子链的是DNA聚合酶，模板是目的DNA片段，所以选D。

3.PCR反应中，一般需要的酶是（）

A.限制性核酸内切酶

B.DNA连接酶

C.TaqDNA聚合酶

D.RNA聚合酶

答案：C。PCR反应中需要TaqDNA聚合酶来催化合成DNA子链，限制性核酸内切酶用于切割DNA，DNA连接酶用于连接DNA片段，RNA聚合酶用于转录过程，所以选C。

4.在PCR反应体系中，除了模板DNA、引物、dNTP外，还需要加入（）

A.ATP

B.缓冲液

C.蔗糖

D.葡萄糖

答案：B。在PCR反应体系中，需要缓冲液来维持反应体系的pH等条件，ATP不是PCR反应必需的，蔗糖和葡萄糖也不是PCR反应体系的成分，所以选B。

5.PCR反应的温度循环变化顺序一般是（）

A.变性-退火-延伸

B.退火-变性-延伸

C.延伸-变性-退火

D.延伸-退火-变性

答案：A。PCR反应先进行高温变性使DNA双链解开，然后低温退火让引物与模板结合，最后适温延伸合成DNA子链，所以顺序是变性-退火-延伸，选A。

6.下列关于PCR引物设计的说法，错误的是（）

A.引物长度一般为15-30个核苷酸

B.引物中G+C含量应尽量高，以提高引物的稳定性

C.引物的3′端应避免形成互补序列，以免形成引物二聚体

D.引物应与模板DNA特异性结合

答案：B。引物中G+C含量一般控制在40%-60%，并非越高越好，过高可能导致引物退火温度过高，不利于反应进行，A、C、D选项关于引物设计的说法均正确，所以选B。

7.PCR扩增过程中，子链的合成方向是（）

A.从5′端到3′端

B.从3′端到5′端

C.可以从5′端到3′端，也可以从3′端到5′端

D.以上都不对

答案：A。DNA子链的合成方向是从5′端到3′端，所以选A。

8.若PCR反应中使用的模板DNA为环状质粒，经过n次循环后，得到的DNA分子数为（）

A.2^n

B.2^n-1

C.2^n+1

D.2n

答案：A。PCR反应中，每次循环DNA分子数会翻倍，经过n次循环后，DNA分子数为2^n，所以选A。

9.在PCR反应中，若引物设计不合理，可能会导致的结果是（）

A.扩增不出目的片段

B.出现非特异性扩增

C.引物二聚体的形成

D.以上都是

答案：D。引物设计不合理，如引物与模板不匹配可能扩增不出目的片段，引物特异性不好可能出现非特异性扩增，引物3′端互补等情况可能形成引物二聚体，所以选D。

10.下列关于实时荧光定量PCR的说法，正确的是（）

A.它是在PCR反应过程中实时监测荧光信号的变化来定量分析目的基因的含量

B.常用的荧光标记方法有SYBRGreenI法和TaqMan探针法

C.可以用于基因表达分析、病原体检测等

D.以上都是

答案：D。实时荧光定量PCR是在PCR反应过程中实时监测荧光信号变化来定量分析目的基因含量，常用SYBRGreenI法和TaqMan探针法等荧光标记方法，可用于基因表达分析、病原体检测等多个方面，所以选D。

11.PCR反应中，dNTP的作用是（）

A.提供能量

B.作为合成DNA子链的原料

C.调节反应体系的离子强度

D.与引物结合

答案：B。dNTP（脱氧核苷三磷酸）是合成DNA子链的原料，不是提供能量，也不调节离子强度和与引物结合，所以选B。

12.若要扩增的目的基因片