情境4基因工程药物人白细胞介素18hIL18的发酵生产任务.pptVIP

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2025-07-22 发布于陕西
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情境4基因工程药物人白细胞介素18hIL18的发酵生产任务.ppt

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LOGO情境4基因工程药物人白细胞介素-18（hIL-18）的发酵生产任务2：发酵进程分析任务目标知识目标：1、了解菌体密度测定方法和注意事项；2、掌握SDS电泳原理及操作方法。能力目标：1、会进行取样和记录；2、会进行菌体密度测定；3、会利用电泳测定目标蛋白表达情况。素质目标：1、细心2、耐心一、实施准备实验仪器超净台、天平、离心机、温控摇床、发酵罐及周边设备、分光光度计、垂直电泳装置。实验材料及试剂hIL-18工程菌甘油种、蛋白胨、酵母抽提物、NaCl、氨苄青霉素（AP）EP管、培养皿、接种针、玻璃棒、滴头吸管、50mL和500mL离心管、10mL带盖螺口试管、500mL摇瓶二、实施步骤每组3～4人，由带教老师介绍发酵过程控制，同时完成不同时段的取样。每组负责测定一个时间点的光密度值，同时制备3～4个平行样品供发酵进程分析用（SDS），注意做好标记。第一次取样为1.1，1.2～1.3或1.4(根据每组人数)，第二次为2.1～2.4，其余类推。每次取样约30mL,测光密度用2mL，1mL用于测定目标蛋白含量。（1）光密度测定方法：波长为600nm时测定细菌的吸光值。（2）SDS+凝胶扫描分析表达水平LOGO