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2025年综合类-自然科学相关工程与技术-基因工程历年真题摘选带答案(5卷单选题100题)

2025年综合类-自然科学相关工程与技术-基因工程历年真题摘选带答案(篇1)

【题干1】在基因工程中，将外源DNA导入宿主细胞常用的方法不包括以下哪种技术？

【选项】A.微弹枪法B.脉冲电穿孔法C.植物病毒载体法D.酶切连接法

【参考答案】D

【详细解析】酶切连接法是DNA重组的核心步骤，用于将目的基因与载体连接，而非导入宿主的方法。微弹枪法通过高压将微弹携带DNA注入细胞，脉冲电穿孔利用电场形成孔洞帮助DNA进入，植物病毒载体法则通过病毒感染宿主传播基因。

【题干2】CRISPR-Cas9系统编辑基因时，sgRNA的作用是？

【选项】A.识别并切割同源模板链B.提供DNA连接酶活性C.精确定位目标基因序列D.激活宿主转录因子

【参考答案】C

【详细解析】CRISPR-Cas9依赖sgRNA（向导RNA）通过互补配对识别并靶向特定DNA序列（如20bp），完成基因定位。切割由Cas9核酸酶完成，而DNA连接酶（如HDR修复需）和转录因子与sgRNA无直接关联。

【题干3】真核生物基因表达调控的主要层次不包括？

【选项】A.启动子区域元件B.细胞质运输机制C.染色质重塑D.表观遗传修饰

【参考答案】B

【详细解析】真核生物基因调控包括转录水平（启动子、增强子）、转录后（RNA加工）、翻译及翻译后（如亚细胞定位）等，但细胞质运输机制属于转运过程，不直接调控基因表达水平。

【题干4】下列哪种酶在DNA重组中既参与切割又参与连接？

【选项】A.限制性内切酶B.DNA连接酶C.T4多聚核苷酸激酶D.末端转移酶

【参考答案】B

【详细解析】DNA连接酶通过催化磷酸二酯键形成，连接被限制性内切酶切割后的黏性末端或平末端DNA。T4激酶（C选项）修复5羟基，末端转移酶（D选项）添加尾碱基，均不直接参与切割。

【题干5】基因工程载体常用的选择标记不包括？

【选项】A.氨苄青霉素抗性基因B.新霉素抗性基因C.细胞色素P450基因D.噬菌体裂解基因

【参考答案】C

【详细解析】氨苄青霉素和四环素抗性基因（A、B）是常用筛选标记，噬菌体裂解基因（D）可驱动载体复制。细胞色素P450基因（C）与抗生素抗性无关，属于代谢酶基因，通常不用于载体筛选。

【题干6】基因枪法（Gene枪法）主要用于哪种生物的遗传转化？

【选项】A.哺乳动物细胞B.植物细胞C.病毒粒子D.细菌

【参考答案】B

【详细解析】基因枪法通过高速金属颗粒携带DNA轰击细胞膜，因植物细胞壁致密且存在细胞质隔离层，该法对植物细胞转化效率显著高于哺乳动物细胞（需电穿孔或脂质体）或细菌（转化效率高但无需物理方法）。

【题干7】在构建表达载体时，若需在真核生物中实现基因沉默，应优先选择哪种启动子？

【选项】A.氨基酸tRNA启动子B.CMVimmediate-early启动子C.酵母α-启动子D.U6snRNA启动子

【参考答案】D

【详细解析】U6snRNA启动子属于RNA聚合酶III启动子，常用于诱导RNA干扰（RNAi）或miRNA表达，可精准调控基因沉默。CMV启动子（B）为强启动子，α-启动子（C）用于原核基因表达，tRNA启动子（A）效率低，均不适用于基因沉默。

【题干8】基因编辑工具中，CRISPR-Cas12i与CRISPR-Cas9的关键区别在于？

【选项】A.激活方式B.DNA识别序列长度C.依赖ATP供能D.切割偏好性

【参考答案】C

【详细解析】Cas12i为ATP依赖型核酸酶，切割前需ATP提供能量，而Cas9为Mg2?依赖型。两者均通过单链向导RNA（sgRNA）靶向DNA，但Cas12i无内切酶结构域，需外源DNA模板辅助进行DNA合成修复（DSB），切割偏好性（D选项）与Cas9无显著差异。

【题干9】在构建重组质粒时，若载体与插入片段的粘性末端不匹配，可能导致？

【选项】A.插入片段丢失B.同源重组失败C.非特异性连接D.表达产物截短

【参考答案】C

【详细解析】限制性内切酶切割后若末端不匹配，需使用连接酶直接连接，易形成非同源末端连接（NHEJ），导致载体与插入片段随机连接（C选项）。若同源重组失败（B选项）需依赖载体设计中的同源臂。

【题干10】基因治疗中，腺相关病毒（AAV）载体因携带哪种基因而具有自我限制特性？

【选项】A.hBxb1基因B.hItrac基因C.hCFTR基因D.h