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克隆与医学治疗性克隆的三条原则取得的材料,必须是自愿的,不能是骗来的或是买来的,提供者有知情权胚胎细胞保留时间不能超过14天,超过则有克隆人之嫌不能将克隆的胚胎细胞植入人体子宫第62页,共67页,星期日,2025年,2月5日禁止任何形式克隆人2005年2月18日,第五十九届联合国大会法律委员会以71票赞成、35票反对、43票弃权的表决结果、以决议形式通过了一项政治宣言,要求各国禁止有违人类尊严的任何形式的克隆人。当时,中国同比利时、英国、瑞典、日本和新加坡等国投了反对票。中国投反对票并不意味着支持克隆人,而是反对禁止治疗性克隆研究。换言之,即反对用胚胎克隆一个完整的人,而支持胚胎研究并从胚胎中提取干细胞用以治疗多种疾病,同时,中国还承诺要加强对治疗性克隆研究的管理和控制,确保人尊严和国际公认的生命伦理原则不受损害。第63页,共67页,星期日,2025年,2月5日三、性染色质性染色质(sexchromatin)◆概念:指间期核中性染色体的异染色质部分显示出来的一种特殊结构。分为X染色质和Y染色质。1、X染色质:雌性哺乳动物间期细胞核内存在的与性别及性染色体数目有关的染色质小体。又称之为性染色质体(sexchromatinbody)或巴氏小体(Barrbody)。◎为什么正常女性的间期细胞核中有巴氏小体,而男性没有?这种差异的原因?◎为什么正常女性两条X染色体的基因产物并不比男性多?◎为什么某一X--连锁的突变基因纯合女性的病情并不比男性严重?第64页,共67页,星期日,2025年,2月5日克隆与医学细胞核移植技术的技术路线(1)供体细胞的准备(2)受体细胞的准备(3)核移植(4)重构胚的培养及移植第30页,共67页,星期日,2025年,2月5日(1)供体细胞的准备用于细胞核移植的供体(donor)细胞有:早期胚胎细胞、胚胎干细胞和体细胞,它们可来自活体或体外培养的细胞。供体核处在GO/G1期:容易获得最佳克隆效果。这时的细胞虽然代谢比较活跃,但细胞却置身于细胞分裂周期之外;供体核处在S/G2期:受体卵母细胞质指导的潜在的基因组复制将导致异常的发育。第31页,共67页,星期日,2025年,2月5日胚胎细胞核移植体细胞核移植第32页,共67页,星期日,2025年,2月5日(2)受体细胞的准备核移植的受体(recipient)细胞有:去核卵细胞、受精卵和2细胞胚胎,其中多以卵细胞作为受体。卵细胞一般采用超排卵法或卵巢的卵泡,经体外培养成熟而获得。将收集到的受体细胞经显微操作或其他方式去除细胞核。供体细胞与受体细胞的细胞周期同步化。第33页,共67页,星期日,2025年,2月5日卵母细胞的去核:第34页,共67页,星期日,2025年,2月5日(3)核移植利用显微操作技术,将供体核移入去核受体细胞质形成重构胚。卵子的激活:在正常受精过程中,精子穿过透明带及卵黄膜时,引起卵子内钙离子浓度升高,卵子细胞周期恢复,启动胚胎发育,这一现象称为激活。胚胎克隆时,通常用一定强度的电脉冲作用卵母细胞。第35页,共67页,星期日,2025年,2月5日(4)重构胚的培养及移植完成核移植后形成的单个细胞在体外培养一段时间,或者是移入离体输卵管(同种或异种)进行体外培养,待获得发育的重构胚(囊胚或桑椹胚)后再移入雌性子宫或输卵管进行发育,直到出生。通过核移植得到的胚胎可作供体,再进行细胞核移植,称再克隆。第36页,共67页,星期日,2025年,2月5日2.1.3.体细胞与去核卵细胞融合技术供体细胞不一定是核,可以是含部分细胞质甚至是整个细胞不进行核移植,而是用细胞融合技术,使供核细胞与去核卵细胞融合获得重构胚融合方法有:电融合、化学融合、病毒融合等。第37页,共67页,星期日,2025年,2月5日2.2.治疗性克隆技术克隆与医学治疗性克隆技术是克隆技术、胚胎干细胞技术、移植技术结合的一种综合技术。SomaticcellnucleartransferdirectdifferentiationReplacetherapyEstablishofEScells第38页,共67页,星期日,2025年,2月5日2.2.治疗性克隆技术取患者体细胞,体外培养,使细胞同步化显微注射移入去核卵母细胞构建重构胚体外培养至囊胚分离细胞团,获得胚胎干细胞对胚胎干细胞进行基因修饰,定向诱导分化移植入患者病变部位,替代病损细胞、组织器官,达到治疗的效果第39页,共67页,星期日,2025年,2月5日人的治疗性克隆(左)和生殖性克
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