蛋白质化学课件.pptVIP

苯異硫氰酸（PITC，Edman反應）PITCPTC-氨基酸PTH-氨基酸PTC：苯氨基硫甲醯；PTH：苯乙內醯硫脲5-二甲氨基萘-1-磺醯氯反應用途：N端氨基酸標記；微量氨基酸定量螢光醯基化反應苄氧羰醯氯苄氧羰醯-氨基酸用途：蛋白質人工合成中氨基保護劑成鹽和成酯反應七、氨基酸的分離和分析鑒定蛋白質的水解→氨基酸混合物酸水解：6mol/LHCl,110–120?C,24h堿水解：5mol/LNaOH110?C,24h酶水解：（部分水解）氨基酸的分離鑒定紙層析薄層層析離子交換柱層析紙層析(paperchromatography)紙層析是以濾紙為惰性支持物的分配層析。濾紙纖維上的羥基具有親水性，吸附一層水作為固定相，有機溶劑為流動相。有機相流經固定相支持物時，與固定相之間連續抽提，使物質在兩相間不斷分配而得到分離。溶質在濾紙上的移動速度用Rf值表示：（物質結構、溶劑系統的物質組成等因素都會影響Rf值）Rf＝原點到層析斑點中心的距離原點到溶劑前沿的距離原點前沿雙向紙層析薄層層析（thin-layerchromatography）以矽膠、氧化鋁、纖維素粉等為支持劑支持劑塗布於玻璃板上→均勻薄層樣品滴加在薄層一端離子交換柱層析（ion-exchangecolumnchromatography）以離子交換樹脂作為支持物，離子交換樹脂上的活性基團可與溶液中的離子（氨基酸）進行交換反應，由於各種離子交換能力不同，與樹脂結合的牢固程度就不同，在洗脫過程中，各種離子以不同的速度移動，從而達到分離的目的。離子交換樹脂：

人工合成的聚苯乙烯一苯二乙烯組成的具有網狀結構的高分子聚合物陽離子交換樹脂陰離子交換樹脂AA2.975.689.74第三節

蛋白質的結構

自然界存在的蛋白質1010-1012組成蛋白質的氨基酸——20種20世紀50年代初，Linderstron-Long：蛋白質具有不同結構層次一級結構(primarystructure)二級結構(secondarystructure)三級結構(tertiarystructure)四級結構(quaternarystructure)高級結構蛋白質的分子結構包括:一、蛋白質的一級結構(primarystructure)

定義蛋白質的一級結構指多肽鏈中氨基酸的排列順序和連接方式。主要的化學鍵肽鍵，有些蛋白質還包括二硫鍵。(Peptidebond,Disulfidebond)1.肽鍵和肽鏈肽鍵(peptidebond):一個氨基酸的?-羧基與另一個氨基酸的?-氨基脫水縮合而形成的共價鍵，又稱醯胺鍵。+-HOH甘氨醯甘氨酸肽鍵肽鍵的形成+胱氨酸二硫鍵-HH二硫鍵的形成半胱氨酸肽和多肽鏈*肽：氨基酸通過肽鍵縮合而形成的化合物。*兩分子氨基酸縮合形成二肽，三分子氨基酸縮合則形成三肽……*由少於10個氨基酸相連而成的肽稱為寡肽(oligopeptide)，由更多的氨基酸相連形成的肽稱多肽(polypeptide)。*多肽鏈(polypeptidechain)是指許多氨基酸之間以肽鍵連接而成的一種結構。球棍式投影式透視式二、氨基酸的分類和結構依R基團結構分：非極性氨基酸（NonpolarAminoAcids）9種極性，不帶電荷氨基（Polar,UnchargedAminoAcids）6/7種酸性氨基酸(-)（AcidicAminoAcids）2種鹼性氨基酸(+)（BasicAminoAcids）3種含非極性R基團的氨基酸（甲硫氨酸）含極性不帶電荷R基團的氨基酸

含帶負電荷（酸性）R基團的氨基酸含帶正電荷（鹼性）R基團的氨基酸三、蛋白質中修飾性氨基酸四、非蛋白質氨基酸五、氨基酸的一般性質無色晶體或粉末狀熔點高：200°C紫外吸收性質：芳香、雜環氨基酸光性：Gly除外溶解性：一般溶於水、稀酸堿；不溶於有機溶劑色氨酸：279nm酪氨酸：275nm苯丙氨酸：259nm紫外吸收大多數蛋白質含有這三種氨基酸殘基，所以測定蛋白質溶液280nm的光吸收值是分析溶液中蛋白質含量的快速簡便的方法。光性組成蛋白質的氨基酸除Gly以外，都有手性碳原子，所