木薯MeNRT26基因异源过表达对拟南芥氮素利用效率的分子机制研究.docxVIP

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2025-08-12 发布于广东
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木薯MeNRT26基因异源过表达对拟南芥氮素利用效率的分子机制研究.docx

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木薯MeNRT26基因异源过表达对拟南芥氮素利用效率的分子机制研究

研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．2

1.1木薯作为能量作物的战略地位．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.2拟南芥作为模式植物的优势．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.3氮素高效利用对作物生产的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.4木薯氮代谢相关基因研究的现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

1.5本研究的科学价值与实际应用前景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

2.1实验材料与植物培养条件．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

2.2木薯MeNRT26基因的克隆与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

2.3过表达载体的构建与遗传转化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

2.3.1过表达表达盒的构建策略．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

2.3.2拟南芥遗传转化方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

2.4过表达植株的筛选与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

2.5表型分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

2.5.1生长相关指标测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

2.5.2植株氮素含量与氮效率指数计算．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

2.6基因表达分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

2.7生理生化指标测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

2.7.1叶绿素荧光参数分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

2.7.2氮代谢关键酶活性测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

2.7.3植株氮素吸收与转运相关指标分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

2.8基因组学分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

3.1木薯MeNRT26基因的生物信息学特征分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

3.2过表达植株的表型分析结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

3.2.1生长状况的差异观察．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

3.2.2氮素含量与利用效率的变化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

3.3过表达植株中MeNRT26及相关基因的表达模式．．．．．．．．．．．．．．．39

3.4过表达植株氮代谢相关生理生化特性的变化．．．．．．．．．．．．．．．．42

3.4.1叶绿素荧光参数的变化分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44

3.4.2氮代谢关键酶活性的响应．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45

3.4.3氮素吸收与转运能力的差异．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46

3.5基因组学分析结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47

1.研究背景与意义

随着生物技术的不断进步，基因工程在作物改良中发挥着越来越重要的作用。其中氮素利用效率的提高是作物遗传改良的重要目标之一，氮素是植物生长的关键营养元素，但过量的氮素摄入会导致环境污染，因此深入研究植物对氮素的利用机制，尤其是通过基因手段提升作物的氮素利用效率，具有重要的理论和实践意义。

木薯作为一种重要的热带作物，其氮素利用效率的改良对于提高产量和减少环境污染具有重大意义。MeNRT26基因作为木薯中可能与氮素转运和吸收相关的重要基因，其功能和调控机制的研究尚不完全明确。通过对MeNRT26基因进行异源过表达，研究其对拟南芥氮素利用效率的分子机制，有助于揭示该基因在木薯乃至其他作物中的功能，为作物遗传改