DB12T 359-2008 三代虫病诊断规程.docxVIP

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DB12/T359—2008

三代虫病诊断规程

StandardmethodfordiagnosingGyrodactyliasisinfish

2008-02-19发布2008-03-30实施

2008-02-19发布

天津市质量技术监督局发布

I

DB12/T359—2008

前言

本标准的编写以GB/T1.1-2000的编制要求为指南。

本标准的附录A、B、C为资料性附录。

本标准由天津市水产局提出。

本标准起草单位：天津市水产研究所。

本标准主要起草人：李军、邓威、王玉佩、杨凯、马文婷、王菁。

本标准丁2008年××月首次发布。

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DB12/T359—2008

三代虫病诊断规程

1范围

本规程规定了鱼类三代虫病诊断规程的定义、病原种类、材料和试剂、采样、诊断步骤、病原体计数及结果判定的要求。

本规程适用丁鱼类、两栖类、头足类及甲壳类三代虫病的诊断。

本规程也适用丁指环虫病的诊断。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用丁本标准。

GB/T6682—1992分析实验室用水规格和试验方法

《鱼类寄生虫与j寄生虫病》张剑英主编，科学出版社，1999

《鱼病调查手册》中国科学院水生生物研究所鱼病学研究室编著,上海科学技术出版社，1981,第二版

OIE《水生动物疾病诊断手册》2000第三版

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

三代虫病Gyrodactyliasis

由三代虫属的一些种类寄生鱼体导致寄主各种临床表现的疾病叫三代虫病。

4病原种类

按照《鱼类寄生虫与寄生虫病》1999年第三篇第八章第二节二-三代虫科进行分类，见附录A(资料性附录)。

5材料和试剂

5.1材料

普通光学显微镜、放大镜、双筒解剖镜、载玻片、盖玻片、镊子、手术刀、手术剪、吸水纸、培养皿、滴管。

5.2试剂

0.85%生理盐水、福尔马林(浓度4%～5%、10%)、甘油胶胨、聚乙烯醇。

配置试剂用水符合GB/T6682—1992要求。

6采样及目检

6.1样品目检

首先观察样品体色、肥瘦及活动等情况，记下一切明显的或疑似的病症。当三代虫大量寄生时，病鱼体表可见一层灰白色的粘液，鱼体失去光泽，游动极不正常。观察结束，做好详细记录并进行实验室检查的采样。

2

学兔兔

DB12/T359-2008

6.2采样量

用于检查诊断的鱼应有一定数量，以保证检查结果具有代表性和可靠性，进行三代虫病检查时采集的样品至少5尾~10尾。也可按照OIE《水生动物疾病诊断手册》2000第三版中第二部分鱼类病害、第1.1章、第二部分概论B.采样方法进行采样，见附录B(资料性附录)。

6.3样品运送

实验室检查要用活鱼进行检查，如果是死鱼，必须是新鲜刚死的——揭开鳃盖观察，如鳃瓣鲜红，表示鱼死不久，可以用米检查，否则不能进行检查。

实验室进行主代虫病检查时应在采集的病料加注原池水进行活体运输。每个容器只装运同一种病料送至实验室。如果运输时间超过2h,则应要有增氧设备并应尽量保证低温低密度。

7诊断步骤及保存

7.1成鱼检查

7.1.1体表

首先取载玻片一张，中央滴一滴生理盐水，然后用解剖刀刮取体表两侧粘液，置于载玻片上，用镊子将组织粘液分散，盖上盖玻片，用拇指轻轻压片，即可在显微镜或解剖镜下观察。

7.1.2鳍

日检正常的鱼，取各个鳍进行检查。取载玻片一张，滴一滴生理盐水，剪下各鳍，置于玻片上，解剖镜下检查；日检鱼体各鳍如布溃烂或异常，则取溃烂或异常部位镜下检查。

7.1.3鳃

先用剪刀将左石两边的鳃完整地取出，分别放在培养皿里，并附上左右标记。用剪刀剪取一小块鳃组织(应从每一边鳃的第一片鳃片接近两端的位置剪取),放在载玻片上，滴入一滴生理盐水，盖上盖坡片，用拇指轻轻压片，在显微镜下检查。每边鳃至少要剪两片，鲢鳙鱼还要剪鳃耙；也可把整个鳃放在培养皿里，直接加入生理盐水，将鳃小片逐片剪开，在解剖镜下观察。观察时，用两根解剖针，把鳃丝逐条拉开，或用镊子将每片鳃片的鳃上所有内含物完全刮下，放在培养皿里，用生理盐水稀释、搅匀后，在解剖镜或低倍显微镜下进行检查；也可用清水洗涤数次，倒弃上清液，检查三代虫。

7.2鱼苗检查

将整个鱼苗放置于培养皿中，滴加生理盐水至完全覆盖