色谱定量分析基础.pptVIP

HPLCBusinessDeptShimadzuCorporation色谱定量分析基础第1页，共23页，星期日，2025年，2月5日分析方法（仪器参数）仪器参数选择分析系统（进样方式、色谱柱、检测器）设定分离条件（载气流量、分流比、温度条件）检测器参数（量程、极性、电流） 第2页，共23页，星期日，2025年，2月5日分析方法（数据处理参数）峰处理参数（WIDTH,SLOPE,DRIFT,T.DBL等）定量参数 定量方法： 内标法、外标法、面积归一法等 工作曲线的制作※曲线点数：一点、两点及多点※曲线计算：线性回归、折线、二次曲线、三次曲线定性参数：保留时间及允许误差（时间窗，时间带）第3页，共23页，星期日，2025年，2月5日峰处理参数去除高频噪声数据采集速度，WIDTH/10采一次数据控制S.TEST时间，斜率测试时间为10×WIDTH注：填充柱，峰宽：5S毛细柱，峰宽：2～3SWIDTH：半高峰宽，用于：第4页，共23页，星期日，2025年，2月5日峰宽第5页，共23页，星期日，2025年，2月5日判断峰起点滤除低平噪声（如蛇行等）SLOPE的确定：通过S.TEST进行，测定时间为10倍WIDTH的时间。峰处理参数SLOPE：10倍Width的所有信号的总和，用于：第6页，共23页，星期日，2025年，2月5日斜率增加时，峰检测灵敏度降低；斜率值降低时，峰检测灵敏度提高斜率第7页，共23页，星期日，2025年，2月5日峰处理参数DRIFT：判断相邻峰的积分方式注：1）设定值为0时，积分仪将自动判断2）如DRIFT与基线至峰谷连线较接近时，积分将不稳定，导致面积值变化较大，需加以注意。第8页，共23页，星期日，2025年，2月5日DRIFTDRIFTDRIFTDRIFTDRIFTDRIFT漂移第9页，共23页，星期日，2025年，2月5日峰处理参数设定值为0时，积分仪自动判断；不使用时可设为1000。T.DBL：峰展宽一倍所需要的时间举例：T.DBL＝10min，则Rt＝10min时，峰宽变为2×WIDTH，斜率变为SLOPE/2Rt＝20min时，峰宽变为4×WIDTH，斜率变为SLOPE/4第10页，共23页，星期日，2025年，2月5日T.DBL2xT.DBL4xT.DBLWIDTHSLOPE2WIDTHSLOPE/24WIDTHSLOPE/48WIDTHSLOPE/8变参时间第11页，共23页，星期日，2025年，2月5日积分峰标记（MK）E：超量程峰S：拖尾峰（一般指溶剂峰）T：尾上峰，作过拖尾处理的峰V：与前邻峰垂直分割L：前沿峰标记：第12页，共23页，星期日，2025年，2月5日定性参数保留时间允许误差：时间窗（window%），相对法设定简单，但所测组分保留时间跨度大时，不易设定时间带（band），绝对法设定较繁，需逐一设定示例：时间窗法，设定window=5%，某组分Rt=8.0min，则该组分保留时间允许范围为：8.0±8.0×5%min时间带法，设定band=0.2min，某组分Rt=8.0min，则该组分保留时间允许范围为：8.0±0.2min第13页，共23页，星期日，2025年，2月5日定量参数校正点别（曲线计算方法）单点校正（linear)两点校正（linear)多点校正线性回归点到点连线（折线）二次曲线三次曲线第14页，共23页，星期日，2025年，2月5日单点校正对每一组分仅做一点校正（可以是多次分析同一浓度的标样，取其平均值）标样浓度应尽可能接近实际样品中各组分的浓度单点校正曲线必须通过原点单点校正第15页，共23页，星期日，2025年，2月5日多点校正对每一组分两个或两个以上不同浓度水平的校正当组分响应值随浓度变化而呈非线性变化时须使用多点校正校正曲线可以不通过原点多点校正第16页，共23页，星期日，2025年，2月5日定量参数面积归一化法校正面积归一化法外标法内标法校正方法第17页，共23页，星期日，2025年，2月5日HPLCBusinessDeptS