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食用菌的组织分离技术第1页,共23页,星期日,2025年,2月5日一、实验目的1.掌握几种原种培养基的配方及其制作。2.了解食用菌原种的制作原理,掌握制备过程。3.了解灭菌的基本原理,掌握蒸气灭菌锅的使用方法。第2页,共23页,星期日,2025年,2月5日二、实验材料灭菌锅、超净工作台、培养室、菌种试管玉米粒、铝锅、石膏、碳酸钙、蔗糖、天平、水桶、大盆、牛皮纸、小线绳、玻璃瓶、橡皮筋、75%酒精消毒瓶、75%酒精消毒棉球瓶、接种针、火柴、记号笔。第3页,共23页,星期日,2025年,2月5日原种培养基的常用配方1.玉米粒培养基配方:玉米粒98%石膏1%碳酸钙1%2.棉籽壳培养基配方:棉籽壳88%麸皮10%糖1%碳酸钙1%3.木屑培养基配方:木屑78%麸皮20%糖1%碳酸钙1%第4页,共23页,星期日,2025年,2月5日三实验内容与方法1.配方:玉米粒98%,石膏1%,碳酸1%。2.按制种需要量称取玉米粒、石膏粉和碳酸钙。3.将称好的玉米粒倒入盆内,用清水清洗几次,去掉杂质16~24h,至玉米粒充分吸足水分,但不过分膨胀和不开口为宜。4.将泡好的玉米粒放在锅内,加水浸过玉米粒,放在电炉上煮。检查,一直煮到种子内无白心为止,切不可将种皮煮破。5.将煮好的玉米粒捞出控干水,使玉米粒含水量达55%~60%。第5页,共23页,星期日,2025年,2月5日三实验内容与方法6.将控干的玉米粒放在盆内,然后将称好的石膏粉和碳酸钙倒入盆中搅拌均匀。7.装瓶,将拌匀的培养料装入菌种瓶或菌种袋中,装料要均匀,装至瓶肩处或菌种袋的2/3处。8.装好瓶后,将瓶口包一层防潮纸,用线绳将瓶口扎好,准备灭菌。9.灭菌,方法同母种的灭菌方法,灭菌压强一般为0.12~0.14Mpa,灭菌时间为1.5~2.Oh。第6页,共23页,星期日,2025年,2月5日三实验内容与方法10.接种,接种间消毒与母种相同。接种时一人手拿母种试管,在酒精灯火焰旁用接种钩(铲)将试管内斜面上菌丝体切成小块;另一人将原种瓶瓶口倾斜在酒精灯火焰旁,将瓶盖掀开一个小缝,这时拿母种试管的人迅速将切好的一小块母种移接到原种瓶内,瓶口用酒精灯烧一下,然后立即把原种瓶口盖严,扎好。一般一管母种接九瓶(袋)左右原种。11.把接种好的原种瓶送到所需温度的培养箱或培养室内培养。12.一接种后应经常检查有无杂菌污染。发现污染瓶,立即挑出。13.生长好的原种菌丝洁白、粗壮、纯净,可用来扩大繁殖栽培种。第7页,共23页,星期日,2025年,2月5日(三)原种质量检查无论玉米粒原种还是棉籽壳原种,接种后在25℃左右培养20~40d,菌种即可长满瓶。品质优良的原种,菌丝洁白、纯净、有食用菌特有的香味。若出现黄、绿、黑等颜色的毛状物或菌瓶内有酸、臭味道,即是污染杂菌,不能使用。应将其灭菌后在远离培养场地处深埋。第8页,共23页,星期日,2025年,2月5日四、作业1.如何获得优质的原种?2.制作原种过程中应注意哪些问题?第9页,共23页,星期日,2025年,2月5日实验四栽培种的制作技术第10页,共23页,星期日,2025年,2月5日一、实验目的通过实验,使同学们掌握栽培种的制作方法和接种技术。第11页,共23页,星期日,2025年,2月5日二、实验材料超净工作台、培养室、土式常压灭菌锅、高压灭菌锅、棉籽壳(或玉米芯、木屑)、麦麸(或玉米面、米糠)、过磷酸钙、石膏、水桶、盘称、搪瓷量杯、、聚丙烯塑料袋或菌种瓶、颈圈、棉花、牛皮纸、细线绳、接种勺(或大镊子、接种铲)、小镊子、酒精灯、75%消毒酒精瓶、75%消毒酒精棉球瓶、火柴、记号笔。第12页,共23页,星期日,2025年,2月5日三、实验内容与方法(一)培养基的制作1.配方玉米芯78%、麦麸或米糠13%、玉米面7%、过磷酸钙1%、糖1%(料:水。1:l3~1:I4)。2.拌料根据制种需要按各种营养成分的配比称量各种原料。然后将玉米芯和麦麸玉米面先混合一起。过磷酸钙、蔗糖等混溶在拌料用的水中,搅拌均匀后,泼洒到玉米芯上再搅拌均匀。3.测培养料水分培养料拌好后,用手抓一把培料握在手中,用力捏紧,从手指缝中有水印但无水滴滴下.这时的含水量合适,为62%~64%,若含水量不足.可再加少量的水,充分
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