新型纳米载体固定化酶的研究.pptxVIP

新型纳米载体固定化酶的研究

纳米颗粒是有机或无机材料构成的亚微米基团（尺寸分布在1-100nm之间）什么是纳米材料？

？自然界中的酶至少有70万种,而实现工业应用的仅上百种。因此,在开发利用酶资源方面,可以说才刚刚起步,潜力巨大,迫切需要克服影响酶工业化应用的障碍,实现酶的高效利用。这不仅需要使单个酶在各个体系(水相、油相、油??水界面等)发挥其最高活性,而且需要实现酶的重复利用、实现多酶的协调反应和辅酶再生。近年来,随着纳米科学和纳米技术的迅速发展,有望利用纳米技术实现上述关键技术的突破。1.理想载体材料应具备哪些特点？2.决定酶催化特性的因素有哪些？

主要内容介绍纳米载体固定化酶纳米载体固定化酶的方法酶纳米载体的种类（磁性纳米粒子用于固定化酶的研究）纳米载体的特点及纳米载体固定对酶性质的影响纳米酶催化剂的优点及纳米技术在酶催化应用中的进展纳米载体固定化酶的应用与挑战

一、酶纳米载体的种类金属纳米载体有机纳米载体非金属无机纳米载体复合物纳米载体酶纳米载体（按材料性质分）颗粒型纳米载体使用得较为广泛

磁性纳米粒子用于固定化酶的研究——磁性粒子是一类新型的固定化酶载体材料，具有生物相容性好和固定化酶易从反应混合物中回收等优点。无机磁性纳米粒子应用较多的是。此类载体的核心由磁性纳米颗粒组成，外面包被有一层有机或无机分子的壳，通过这种表面修饰的方法可以在载体表面引入多种反应性功能基团（如羟基、氨基、巯基等），因此该载体可以连接酶、抗体、核酸等生物分子，已被广泛地用于生物学和医学研究。1.决定磁性纳米颗粒的磁学性能的两关键因素——小尺寸效应、表面效应尺寸效应~当纳米颗粒小于单磁畴临界尺寸时，止血颗粒能分散的最好；表面效应~颗粒粒径达到纳米级时，其具有巨大的相对表面积，也使大部分原子都处于颗粒表面，致使其具有更高的表面活性。磁性纳米颗粒具有较大的表面原子/体内原子比，其表面自旋会显著影响磁化能力。2.磁性纳米的表面修饰在利用磁性Fe3O4纳米颗粒作为固定化酶载体前必须对其提供适当的表面包被和有效的保护措施以保持它的稳定性，并可以引入各种功能基团以满足特定的应用环境。该方法主要包括利用有机分子、聚合物、生物分子、无机分子嫁接，包被Fe3O4纳米颗粒。Fe3O4

表面修饰的材料和方法材料方法作用表面活性剂和聚合物化学键合、物理吸附钝化纳米颗粒表面从而避免颗粒的团聚贵金属微乳液、氧化还原防止磁性纳米颗粒的核被氧化二氧化硅Stober法、溶胶-凝胶法、气溶胶高温分解法保持其稳定性，避免颗粒的团聚；该颗粒具有良好的生物相容性、水溶性、稳定性；硅包被标语在颗粒表面偶联各种生物分子且能防止连接在其表面的配体与磁性核的直接接触而发生不必要的发硬；硅包被可维持其物理特性碳电弧放电法、激光消融法、电子照射法、化学气象沉积法碳具良好的化学稳定性、热稳定性和生物相容性比传统包被材料更具优势，但如何得到单分散性的复合物颗粒依然是一项挑战3.应用：磁性生物分离和检测；临床诊断和治疗；药物靶向运输；固定化酶载体

二、纳米载体固定酶的方法吸附法：将制备好的纳米颗粒或其他纳米载体直接加入含有一定浓度酶液的缓冲溶液，在合适条件下纳米载体可以通过静电作用或与氨基酸残基侧链基团之间的特异性结合而将酶分子牢固吸附到纳米载体表面,如金特异性地结合氨基酸残基侧链的巯基和氨基;镍离子特异性地结合蛋白质末端的多聚组氨酸“尾巴”。【优点】操作简单,是目前应用得较为广泛的一种固定化方法,尤其是用于各种酶传感器的制备。用纳米材料制备的各种酶传感器,能显著提高生物传感器的检测极限,增强检测的特异性,缩短电极响应时间。包埋法将酶与聚合物单体在一定的条件下混合,聚合物单体之间发生聚合交联的过程，就可以将酶分子固定到高分子聚合物中;或者是将酶分子包裹在多孔的单分子膜中,形成微胶囊型纳米颗粒。【优点】包埋效率高；固定化稳定性好，酶分子与纳米载体不易解体分离,；对酶结构的完整性也没有显著的影响,；酶的半衰期长达143天

共价结合法：共价结合法：酶和纳米载体以共价键的形式结合在一起,这种方法需要酶和载体都具有氨基、羧基或羟基等官能团。1）直接结合法纳米载体必须携带有能与氨基酸侧链基团发生反应的相应基团,如C60的各种衍生物就可以直接固定各种酶蛋白;2）间接结合法间接法是先在纳米载体颗粒的表面包被上一层携带有活性基团的聚合，或者先将纳米颗粒用具有活性基团的材料胶囊化,然后再与酶分子共价连接。【优点】能有效地防止酶与载体的解离,从而防止酶的丢失;并且有助于防止酶的变性,增强其稳定性。【缺点】反应过程中酶的活性位点被隐藏或限制了活性位点与底物的结合,将不可避免地导致酶活性一定程度的降低。

三、纳米载体的特点及纳米载体固定对酶性