生物药物的质量管理与控制.pptxVIP

第五节基因工程药物质量控制质量标准：基因工程药物定义：采用新的生物技术方法，利用细菌、酵母或哺乳动物细胞作为活性宿主，进行生产的作为治疗、诊断等用途的多肽和蛋白质类药物。

011983重组DNA生产的药品、生物制品的生产和检定要点031988生物技术医药产品临床生物安全性试验要求052000中国生物制品规程021987基因重组技术医药产品的生产及质量控制041990生物技术生产细胞因子的质量控制2、质量标准

目的基因：来源，制备过程，结构01表达载体：性质，来源，结构02宿主细胞:名称，来源，历史等031、原料

表达载体和宿主细胞应提供有关表达载体详细资料，包括基因的来源、克隆和鉴定，表达载体的构建、结构和遗传特性。应说明载体组成各部分的来源和功能，如复制子和启动子来源，或抗生素抗性标志物。提供至少包括构建中所用位点的酶切图谱。应提供宿主细胞的资料，包括细胞株（系）名称、来源、传代历史、检定结果及基本生物学特性等。

应详细说明载体引入宿主细胞的方法及载体在宿主细胞内的状态（是否整合到染色体内）及拷贝数。应提供宿主和载体结合后的遗传稳定性资料。

01克隆基因的序列应提供插入基因和表达载体两侧端控制区的核苷酸序列。所有与表达有关的序列均应详细叙述。表达应详细叙述在生产过程中，启动和控制克隆基因在宿主细胞中的表达所采用的方法及表达水平。02

原辅料原辅料应按照国家药品监督管理局有关规定执行。动物源性原料的使用应提供来源及质控检测资料

01.生产用细胞库：种子批，来源，保存等02.有限代次的生产：条件，材料，方法、代次等03.连续培养：定期检查2、培养过程质量控制

主细胞库（MASTERCELLBANK）rDNA制品的生产应采用种子批（SEEDLOT）系统。从已建立的主细胞库中，再进一步建立生产细胞库（WCB）。含表达载体的宿主细胞应经过克隆而建立主细胞库。在此过程中，在同一实验室工作区内，不得同时操作两种不同细胞（菌种）；一个工作人员亦不得同时操作两种不同细胞或菌种。

应详细记录种子材料的来源、方式、保存及预计使用寿命。应提供在保存和复苏条件下宿主载体表达系统的稳定性证据。采用新的种子批时，应重新作全面检定。

种子批不应含有外源致癌因子，不应含有感染性外源因子，如细菌、支原体、真菌及病毒。有些细胞株含有某些内源病毒，例如逆转录病毒，且不易除去。当已确知在原始细胞库或载体部分中污染此类特定内源因子时，则应能证明在生产纯化过程可使之灭活或清除。

用于培养和诱导基因产物的材料和方法应有详细资料培养过程及收获时，应有敏感的检测措施控制微生物污染。01应提供培养生长浓度和产量恒定性方面的数据，并应确立废弃一批培养物的指标。根据宿主细胞／载体系统的稳定性资料，确定在生产过程中允许的最高细胞倍增数或传代代次，并应提供最适培养条件的详细资料。02有限代次生产

在生产周期结束时，应监测宿主细胞／载体系统的特性，例如质粒拷贝数、宿主细胞中表达载体存留程度、含插入基因的载体的酶切图谱。一般情况下，用来自一个原始细胞库的全量培养物进行监测，必要时应做一次目的基因的核苷酸序列分析。

基本要求同2项。01应提供经长期培养后所表达基因的分子完整性资料，以及宿主细胞的表型和基因型特征。每批培养的产量变化应在规定范围内。对可以进行后处理及应废弃的培养物，应确定指标。从培养开始至收获，应有敏感的检查微生物污染的措施。02连续培养生产

根据宿主／载体稳定性及表达产物的恒定性资料，应规定连续培养的时间。如属长时间连续培养，应根据宿主／载体稳定性及产物特性的资料，在不同间隔时间作全面检定。

杂质：病毒、核酸、杂蛋白、糖等01除杂方法：沉淀、电泳、色谱等02指标：纯度，提纯倍数，收率033、纯化工艺

对于收获、分离和纯化的方法应详细记述，应特别注意污染病毒、核酸以及有害抗原性物质的去除。01采用亲和层析技术（如用单克隆抗体）应有检测可能污染此类外源性物质的方法，不应含有可测出的异种免疫球蛋白。02

对整个纯化工艺应进行全面研究，包括能够去除宿主细胞蛋白、核酸、糖、病毒或其它杂质以及在纯化过程中加入的有害的化学物质等。关于纯度的要求可视制品的用途和用法而确定，例如，仅使用一次或需反复多次使用；用于健康人群或用于重症患者；对纯度可有不同程度要求。

1生物学效价测定：活性蛋白质纯度检查：重组蛋白比活性：单位质量蛋白质所具有的活性2结构3活性4、产品质量控制

非特异性鉴别特异性鉴别相对分子量光谱肽图氨基酸组成等电点氨基酸测序免疫原性蛋白质性质鉴定

氨基酸组成使用各种水解法和分析手段测定氨基酸的组成，并与目的蛋白基因序列推导的氨基酸组成或天然异构体比较。如需要时应考虑分子量的大小。多数情况下，氨基酸组成分析对肽段和小蛋白可提