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新冠病毒核酸检测考核题库附答案

一、新冠病毒核酸检测基础知识

1.单选题

新冠病毒（SARS-CoV-2）属于哪类病原体？

A.双链DNA病毒

B.单股正链RNA病毒

C.单股负链RNA病毒

D.双链RNA病毒

答案：B

解析：新冠病毒基因组为单股正链RNA（+ssRNA），可直接作为mRNA参与蛋白质合成，属于冠状病毒科β属。

2.多选题

以下关于新冠病毒生物学特性的描述正确的是？

A.对紫外线敏感

B.56℃30分钟可灭活

C.75%乙醇可有效灭活

D.氯己定（洗必泰）能有效灭活

答案：ABC

解析：新冠病毒对紫外线和热敏感（56℃30分钟），75%乙醇、含氯消毒剂（如84消毒液）、过氧乙酸等可有效灭活，但氯己定不能有效灭活。

3.判断题

新冠病毒主要通过呼吸道飞沫和密切接触传播，在相对封闭环境中经气溶胶传播的可能性存在。（）

答案：√

解析：《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第九版）》明确，新冠病毒传播途径包括飞沫传播、密切接触传播和气溶胶传播（特定条件下）。

4.简答题

简述新冠病毒核酸检测常用的靶基因及其选择依据。

答案：

常用靶基因为ORF1ab基因、N基因（部分试剂包含E基因）。选择依据：

（1）ORF1ab基因编码病毒复制酶，序列保守性高，可提高检测敏感性；

（2）N基因编码核衣壳蛋白，拷贝数高，利于早期检测；

（3）多靶标联合检测可降低因病毒变异导致的漏检风险（如德尔塔、奥密克戎变异株可能在单个靶标上出现突变）。

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二、核酸检测操作流程

5.单选题

咽拭子采集时，正确的操作是？

A.擦拭单侧扁桃体后立即取样

B.用拭子头快速擦拭双侧扁桃体及咽后壁

C.拭子深入口腔后触碰舌面

D.采集后将拭子插入生理盐水管保存

答案：B

解析：咽拭子采集需用无菌拭子越过舌根，擦拭双侧腭扁桃体及咽后壁，避免触碰舌面、唾液等干扰物，采集后应立即放入病毒保存液中。

6.多选题

新冠病毒核酸检测样本运输的要求包括？

A.2-8℃条件下24小时内送检

B.冷冻样本（-20℃或-70℃）运输需使用干冰

C.运输箱需标注“高致病性病原微生物样本”标识

D.样本与冰袋可直接接触

答案：ABC

解析：样本运输需防渗漏、防冻结（病毒保存液含胍盐，冻结可能破坏样本），不可与冰袋直接接触；运输箱需标注生物危害标识及“高致病性病原微生物”。

7.判断题

核酸提取时，磁珠法的原理是利用磁珠表面的硅羟基与核酸的磷酸基团结合，通过磁力分离实现纯化。（）

答案：√

解析：磁珠法提取核酸的核心是硅羟基（-Si-OH）在高盐低pH条件下与核酸磷酸基团（-PO??）结合，低盐高pH条件下解离，通过磁力架分离磁珠与杂质。

8.简答题

简述荧光定量PCR检测的主要步骤及各步骤的温度设置（以两步法为例）。

答案：

主要步骤及温度设置：

（1）反转录（RT）：50℃15-30分钟（将病毒RNA反转录为cDNA）；

（2）预变性：95℃2-5分钟（激活Taq酶，破坏cDNA二级结构）；

（3）PCR扩增（40循环）：

-变性：95℃10-15秒（双链DNA解链为单链）；

-退火/延伸：60℃30-60秒（引物结合靶序列，Taq酶延伸合成新链，同时荧光探针被切割释放荧光）。

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三、质量控制与结果判读

9.单选题

实验室室内质控中，阴性质控品检测结果应为？

A.阳性（Ct值＜35）

B.阴性（无Ct值或Ct≥40）

C.弱阳性（Ct值35-40）

D.结果无要求

答案：B

解析：阴性质控品（不含新冠病毒核酸）检测结果应无扩增曲线或Ct值≥40，若出现阳性结果提示可能存在交叉污染（如扩增产物污染、加样错误）。

10.多选题

导致核酸检测假阴性的可能原因包括？

A.样本采集时未触及感染部位（如咽拭子仅擦拭舌尖）

B.病毒载量低于检测下限（如潜伏期早期）

C.核酸提取过程中操作失误（如磁珠丢失）

D.PCR反应体系中引物与病毒变异株不匹配

答案：ABCD

解析：假阴性常见原因包括样本质量差（采集部位错误）、病毒载量低、提取效率低（操作失误）、引物探针与变异株序列不匹配（如靶标区域突变）。

11.判断题

新冠核酸检测结果判读时，若样本Ct值为38且扩增曲线明显，应判定为阳性。（）

答案：√

解析：根据《新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南》，Ct值≤40且扩增曲线明