DB31T+1512-2024猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪德尔塔冠状病毒鉴别技术要求.docxVIP

ICS11.220

31CCSB41

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上 海 市 地 方 标 准

DB31/T1512—2024

猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪德尔塔冠状病毒鉴别技术要求

Authenticationrequirementsforporcineepidemicdiarrheavirus,porcinetransmissiblegastroenteritisvirusandporcineDeltacoronavirus

2024-10-11发布 2025-02-01实施

上海市市场监督管理局 发布

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I

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II

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目 次

前言 II

范围 1

规范性引用文件 1

术语和定义 1

缩略语 1

试剂和仪器设备 1

仪器设备 1

试剂 2

材料 2

实验室分区 2

样品采集与处置 2

生物安全 2

样品采集和预处理 2

样品存放与运输 2

操作方法 2

样品RNA的制备 3

反转录（cDNA的合成） 3

RT-PCR检测 3

电泳检测 3

结果判定 3

试验成立条件 3

检测结果判定 3

附录A（规范性）试验试剂和溶液的配制 5

0.01mol/L（pH7.2）PBS 5

1×TAE 5

DEPC处理水 5

1.5%琼脂糖凝胶 5

附录B（规范性）猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪德尔塔冠状病毒mRT-PCR引物序列6附录C（规范性）猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪德尔塔冠状病毒mRT-PCR扩增结果电泳图 7

附录D（资料性）猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪德尔塔冠状病毒mRT-PCR扩增目的基因序列 8

猪流行性腹泻病毒（PEDV）M基因扩增序列（5’―3’，332bp） 8

猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）N基因扩增序列（5’―3’，226bp） 8

猪德尔塔冠状病毒（PDCoV）M基因扩增序列（5’―3’，504bp） 8

图C.1猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪德尔塔冠状病毒mRT-PCR扩增结果电泳图7

表B.1猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪德尔塔冠状病毒mRT-PCR引物扩增序列 6

前 言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容有可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由上海市农业农村委员会提出并组织实施。

本文件由上海市畜牧业标准化技术委员会归口。

本文件起草单位：上海市农业科学院、上海市动物疫病预防控制中心。

本文件主要起草人：刘惠莉、陶洁、李本强、程靖华、刘佩红、石迎、林鸷、周锦萍。

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猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪德尔塔冠状病毒鉴别技术要求

范围

本文件规定了猪流行性腹泻病毒（porcineepidemicdiarrheavirus,PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（porcinetransmissiblegastroenteritisvirus,TGEV）和猪德尔塔冠状病毒（porcinedeltacornovirus,PDCoV）鉴别的试剂和仪器设备、样品采集与处置、操作方法、结果判定等技术要求。

本文件适用于猪粪便、肛门拭子和肠组织样品中PEDV、TGEV和PDCoV的核酸检测。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T36871猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒多重RT-PCR检测方法

NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

缩略语

下列缩略语适用于本文件。

DEPC：焦碳酸二乙酯（DiethylPyrocarbonate）

mRT-PCR：多重RT-PCR(MultiplexReverseTranscription-PolymeraseChainReaction)PDCoV：猪德尔塔冠状病毒（PorcineDeltacornovirus）

PEDV：猪流行性腹泻病毒（PorcineEpidemicDiarrheaVirus）PBS：磷酸盐缓