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选修1生物技术实践专题2微生物的培养与应用

考纲内容及能力要求考向定位1．微生物的分离与培养2．某种微生物数量的测定3.培养基对微生物的选择作用4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用1．了解微生物所需要的营养要素2．理解培养基的概念3．了解培养基的种类和配制原则4．掌握微生物培养的无菌技术5．了解微生物的实验室培养6.了解土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

基础梳理

生命系统的结构层次基础梳理1.微生物的营养(1)碳源碳源是为微生物生长提供所需要的__________元素的物质，__________型微生物的碳源主要是有机碳。__________型微生物利用CO2或碳酸盐作为碳源。(2)氮源：氮源是提供微生物生命活动所需要的__________元素的物质。(3)水：水是微生物生命活动必需的一种重要物质。碳异养自养氮

无机盐无机盐对微生物的生理功能有：构成微生物细胞的组成成分；作为酶的组成成分，也是某些酶的激活剂；调节和维持微生物细胞的渗透压和pH；某些无机盐具有特殊功能，如化能自养细菌的能源物质NH4+等。生长因子。培养微生物还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

2.培养基(1)培养基的概念：人们按照微生物对__________的不同需求，配制出供适合其__________的营养基质。(2)配制原则目的要明确；营养要协调；pH要适宜；要经济节约。(3)培养基的类型①按照培养基的物理性质可以分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基。②按照培养基的化学成分可以分为合成培养基（用化学成分已知的化学物质配制而成的，用于分类鉴定）和天然培养基（用天然物质配制而成，用于工业生产）。③按照培养基的用途可以分为选择培养基和鉴别培养基等。生长繁殖营养物质

3.无菌技术(1)无菌技术的主要内容①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。(2)实验室常用的消毒方法__________消毒；__________消毒；__________消毒。煮沸化学药物紫外线

(3)实验室常用的灭菌方法①灼烧灭菌：将微生物的__________，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在_______________________灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，__________或__________等容易被污染的部位，也可以通过__________来灭菌；②干热灭菌：能耐高温的，需要保持__________的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的_______________内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。接种工具酒精灯火焰的充分燃烧层试管口瓶口火焰灼烧干燥高压蒸汽灭菌锅

4.微生物实验室培养的实验操作(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基其基本过程为__________、__________、__________、__________、__________五个步骤。(2)纯化大肠杆菌①原理：在培养基上将细菌稀释或分散成__________细胞，使其长成__________的菌落，这个__________菌落就是一个纯化的细菌菌落。计算称量溶化灭菌倒平板单个单个单个

②微生物常见的接种的方法平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成__________，接种，划线，在__________里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成__________菌落。稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量__________后，均匀__________在培养皿表面，经培养后可形成__________菌落。单个平板恒温箱单个稀释涂布

一、培养基不同的微生物需要采用不同的培养基配方，尽管培养基的配方各不相同，但是其基本成分都包括水、碳源、氮源和无机盐。1.培养基的配制原则(1)目的要明确:目的包含两层含义：一指培养的微生物种类；二指培养的目的，是用于生产还是科学研究，因为二者对培养基的化学成分、物理状态等方面要求不同，例如用于生产的培养基应具有原料易得、价格低廉、配制方便等特点，而用于科学研究的培养基应具有成分含量准确，可多次重复实验的特点。归纳整合

培养基配制的程序及注意事项培养基配制的程序计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板培养基配制时的注意事项全程要求无菌操作，无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生