五年（2021-2025）全国高考生物真题分类汇编 专题22 基因工程（全国通用）（解析版）.docxVIP

专题22基因工程

考点

五年考情（2021-2025）

命题趋势

考点1基因工程的工具及其操作步骤

（5年5考）

2025全国、安徽、河北、江苏、重庆、甘肃、云南、湖南、广东、河南、北京、陕晋青宁、山东、黑吉辽蒙、浙江

2024北京、贵州、甘肃、湖北、江西、浙江、安徽、湖南、广东、河北、山东、吉林、全国、重庆

2023浙江、广东、湖南、天津、湖北、山西、北京、山东、海南、全国

2022重庆、辽宁、北京、湖北、山东、浙江、河北、福建、天津、江苏、湖南、广东、全国

2021天津、江苏、湖北、辽宁、北京、重庆、海南、福建、山东、浙江、湖南、河北、广东、全国

从近五年全国各地的高考试题来看，基因工程专题常以科研为情景，注重运用教材的基础知识解决现有的问题，多考查基因工程的工具及其操作步骤、蛋白质工程。此部分内容集中在非选择题部分考察。

考点2生物技术伦理

（5年4考）

2024浙江、广东

2023浙江

2022辽宁、北京

2021北京、河北

考点01基因工程的工具及其操作步骤

2025年高考真题

1．（2025·全国卷·高考真题）琼脂糖凝胶电泳常用于核酸样品的分析，样品1～4的电泳结果如图所示（“+”“-”分别代表电泳槽的阳极和阴极）。已知样品1和2中的DNA分子分别是甲和乙，甲只有限制酶R的一个酶切位点，样品3和4中有一个样品是甲的酶切产物。下列叙述错误的是（????）

A．配制琼脂糖凝胶时需选用适当的缓冲溶液

B．该实验条件下甲、乙两种DNA分子均带负电荷

C．甲、乙两种DNA分子所含碱基对的数量可能不同

D．据图推测样品3可能是甲被酶R完全酶切后的产物

【答案】D

【分析】限制酶酶切其基本原理是利用限制酶对DNA上特定序列的识别，来确定切割位点并实现切割，从而获得所需的特定序列。

【详解】A、配制琼脂糖凝胶时选用适当缓冲溶液，可维持电泳过程中体系的pH稳定，保证核酸分子正常泳动，A正确；

B、电泳时，样品向+极移动，说明在该实验条件下甲、乙两种DNA分子均带负电荷，符合核酸分子在电泳中的带电特性，B正确；

C、电泳中，DNA分子的迁移速率与分子大小、电荷的多少等多种因素有关。甲、乙电泳条带位置虽然相同，但影响DNA分子的迁移速率的因素很多，所以碱基对的数量可能不同，C正确；

D、甲只有限制酶R的一个酶切位点，若被酶R完全酶切，只会得到2种DNA片段（2个条带），这两个条带的碱基数量比甲要少，电泳跑的距离要比甲更远，所以据图推测样品4才是甲被酶R完全酶切后的产物，D错误。

故选D。

2．（2025·安徽·高考真题）质粒K中含有β-半乳糖苷酶基因，将该质粒导入大肠杆菌细胞后，其编码的酶可分解X-gal，产生蓝色物质，进而形成蓝色菌落，如图所示。科研小组以该质粒作为载体，采用基因工程技术实现人源干扰素基因在大肠杆菌中的高效表达。下列叙述错误的是（????）

A．使用氯化钙处理大肠杆菌以提高转化效率，可增加筛选平板上白色和蓝色菌落数

B．如果筛选平板中仅含卡那霉素，生长出的白色菌落不可判定为含目的基因的菌株

C．因质粒K中含两个标记基因，筛选平板中长出的白色菌落即为表达目标蛋白的菌株

D．若筛选平板中蓝色菌落偏多，原因可能是质粒K经酶切后自身环化并导入了大肠杆菌

【答案】C

【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样；（4）目的基因的检测与鉴定。

【详解】A、使用氯化钙处理大肠杆菌，可使其处于感受态，提高转化效率，即更多的大肠杆菌能吸收质粒，无论吸收的是含目的基因的重组质粒（可能形成白色菌落）还是未重组的质粒K（形成蓝色菌落），都可增加筛选平板上白色和蓝色菌落数，A正确；

B、由于仅含卡那霉素，未添加X-gal，无论导入的是重组质粒还是空白质粒，因不含X-gal，无法产生蓝色物质，故生长出的菌落均为白色，B正确；

C、筛选平板中长出的白色菌落，可能是导入了重组质粒（含目的基因），但也可能是虽然导入了质粒但目的基因没有成功表达目标蛋白，不能仅仅因为是白色菌落就判定为表达目标蛋白的菌株，C错误；

D、若筛选平板中蓝色菌落偏多，原因可能是质粒K经酶切后自身环化并导入了大肠杆菌，因为自身环化的质粒K中β-半乳糖苷酶基因完整，能表达活性β-半乳糖苷酶，分解X-gal形成蓝色菌落，D正确。

故选C。

3．（2025·河北·高考真题）（多选）X染色体上的D基因异常可导致人体患病，在男性中发病率为1/3500，某患病男孩（其母亲没有患病）X染色体上的基因