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丁吡吗啉对致病疫霉的生物活性剖析及室内抗性风险评估
一、引言
1.1研究背景
马铃薯和番茄作为全球广泛种植的重要经济作物,在农业生产和人类饮食结构中占据着举足轻重的地位。然而,由致病疫霉(Phytophthorainfestans)引起的晚疫病,如同高悬在马铃薯和番茄产业头上的达摩克利斯之剑,对其产量和品质构成了严重的威胁。
致病疫霉在适宜的环境条件下,如温暖潮湿的气候,其繁殖速度极为惊人,能够迅速在田间传播扩散。一旦感染,植株的叶片会首先出现暗绿色水渍状病斑,随着病情的发展,病斑逐渐扩大并转为黑褐色,严重时叶片枯萎脱落。茎部也会受到侵染,出现褐色条斑,导致植株生长受阻。块茎受害后,内部组织逐渐腐烂,失去食用和种用价值。据统计,在病害流行年份,马铃薯和番茄因晚疫病导致的产量损失可达20%-40%,甚至更高,这不仅给农民带来了巨大的经济损失,也对全球粮食安全造成了一定的影响。例如,在历史上著名的爱尔兰大饥荒中,马铃薯晚疫病的爆发导致大量马铃薯绝收,引发了严重的粮食危机,对当地社会和经济产生了深远的影响。
在应对致病疫霉的挑战中,化学防治一直是主要的手段之一。然而,长期以来,传统杀卵菌药剂如甲霜灵、嘧菌酯等的大量和不合理使用,使得致病疫霉对这些药剂产生了广泛的抗药性。以甲霜灵为例,自其投入使用以来,短短几十年间,许多地区的致病疫霉菌株对甲霜灵的抗性频率急剧上升,抗性水平也不断提高。这使得原本有效的药剂在防治晚疫病时效果大打折扣,农民不得不增加用药量和用药次数,这不仅增加了生产成本,还进一步加剧了环境污染和农产品质量安全问题。
为了打破这一困境,寻找新型、高效、低毒且不易产生抗药性的杀菌剂成为当务之急。丁吡吗啉(pyrimorph)作为我国具有自主知识产权的新型杀菌剂,其化学名为(E)-3-(2-氯吡啶4-基)-3-(4-叔丁基苯基)-丙烯酰吗啉,在这一背景下应运而生。研究表明,丁吡吗啉在离体条件下对致病疫霉、辣椒疫霉(Phytophthoracapsici)、古巴假霜霉(Pseudoperonosporacubensis)等多种卵菌均表现出良好的抑制活性,展现出在卵菌病害防治领域的巨大潜力。对丁吡吗啉进行深入研究,明确其对致病疫霉的生物活性及其室内抗性风险,对于开发新型杀菌剂、有效控制晚疫病的流行以及保障马铃薯和番茄产业的可持续发展具有重要的现实意义。
1.2国内外研究现状
在全球范围内,对丁吡吗啉的研究逐渐成为杀菌剂领域的焦点之一。国外研究主要聚焦于新型杀菌剂的开发以及作用机制的探索,虽然丁吡吗啉作为我国自主研发的杀菌剂,国外直接针对它的研究相对较少,但在卵菌病害防治和杀菌剂抗性研究的大背景下,相关成果仍具有一定的参考价值。
在国内,丁吡吗啉的研究已取得了一系列成果。在生物活性方面,研究表明丁吡吗啉在离体条件下对多种卵菌表现出良好的抑制活性。黄雄英等通过室内生物测定发现,丁吡吗啉对致病疫霉的菌丝生长、孢子囊产生、休止孢萌发具有较强的抑制作用,其EC??值分别为0.066、0.059和0.550μg/mL,但对游动孢子释放的抑制作用较弱,其EC??值为9.78μg/mL。秦维彩等研究发现,丁吡吗啉对辣椒疫霉的菌丝生长、孢子囊产生、释放游动孢子的EC??值分别为2.96μg/mL、3.07μg/mL、20.19μg/mL。
盆栽试验进一步验证了丁吡吗啉在实际应用中的效果。陈小霞等研究发现,丁吡吗啉在防治番茄晚疫病时具有良好的保护效果,但治疗效果较差。用浓度为400和800mg/L的丁吡吗啉对番茄植株喷雾,自然风干后接种致病疫霉的孢子悬浮液,其保护效果分别为94.1%和100%;番茄植株前期接菌处理,24h后用浓度为400、800和1000mg/L的丁吡吗啉对番茄植株喷雾,其治疗效果分别是39.3%、64.9%和84.7%。此外,丁吡吗啉在防治番茄晚疫病时持效期长于8天,且番茄根系对丁吡吗啉有一定的内吸性,但内吸输导性较差。
在抗性风险研究上,也取得了一定进展。陈小霞等通过含药培养基驯化10代,获得了2株致病疫霉的抗丁吡吗啉的突变体菌株F5和F8,抗性菌株的抗性倍数分别是1.96和5.17;经过紫外线辐射新生菌丝的方法,获得了5株致病疫霉的抗丁吡吗啉的突变体菌株,最高抗性菌株UV15的抗性倍数是7.66,最低抗性菌株UV11的抗性倍数为1.53。对突变体菌株的生物学性质分析发现,突变体菌株的抗性上升速度较慢,抗性突变体菌株在培养基平板上的菌丝生长速率和产孢能力较亲本菌株有明显的下降。
然而,目前的研究仍存在一定的局限性。在生物活性研究方面,对于丁吡吗啉在不同环境条件下对致病疫霉的活性影响研
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