静电纺载药径向取向纳米纤维敷料的制备及其修复糖尿病难愈合创面的研究.pdfVIP

摘要

糖尿病是一种高发性慢性疾病，常伴有严重的并发症。据统计，25%的糖尿病患

者患有溃疡引起的慢性皮肤损伤。创面敷料作为一种不可缺少的创面治疗用医疗产

品，已被广泛用于辅助受损皮肤组织的重建和再生。相对理想的创面敷料应具有高

生物相容性、可生物降解性、较强的机械稳定性以及恰当的生物功能性，能够有效

地将复杂的病理微环境调节为促进愈合的微环境，从而加速创面的高质量愈合与修

复。遗憾的是，目前临床上仍缺乏合适的敷料产品来提升糖尿病慢性创面的治疗效

果。本研究拟采用改进的静电纺丝技术研发出一款新型载药径向取向纳米纤维敷料

贴片，对其形貌、结构以及各项性能进行系统研究，并探讨其对小鼠糖尿病慢性创

面的治疗效果。然后，基于“湿性愈合理论”，以载药径向取向纳米纤维膜为基底

材料，结合多组分光交联成胶技术，加工出一款载药径向取向纳米纤维/水凝胶复合

敷料，并进一步探讨其各项性能及其对小鼠糖尿病慢性创面的疗效。

首先，设计并开发了一种新型静电纺纳米纤维接收装置，在平板上设置一系列

金属针-圆环同心结构作为微型接收器，实验证明，该微型接收器可以实现静电纺纳

米纤维的径向取向排列。选用羟基丁酸和羟基戊酸共聚物（PHBV）为模型聚合物，

首先研究了PHBV纺丝液浓度对纳米纤维的结构和性能的影响，结果表明，浓度为

12%（w/v）的溶液纺出的PHBV纳米纤维平均直径为402.8±107.9nm，结构均匀，

无串珠，且对细胞的粘附和增殖有一定促进作用。进一步采用该PHBV纺丝浓度，

利用自制的接收装置，加工了PHBV径向取向纳米纤维膜，并与常规PHBV随机排

列纳米纤维膜进行了对比研究，结果表明，与随机排列的PHBV纳米纤维膜相比，

径向取向排列的PHBV纳米纤维膜的力学性能明显增强，表面疏水性明显降低。细

胞实验表明，径向取向排列的PHBV纳米纤维膜的生物特性也得到了显著提升，与

随机排列的PHBV纳米纤维膜相比，其可以显著促进细胞的粘附和增殖，有效地诱

导细胞的取向排列。更重要的是，PHBV径向取向纳米纤维膜可以控制细胞的迁移

方向，诱导细胞由膜四周向膜中心快速迁移。

然后，为了赋予敷料更好的生物功能性，在静电纺丝过程中将两种不同浓度的

小檗碱（Beri，一种异喹啉生物碱）包埋在PHBV纳米纤维中，来获得载药PHBV

径向取向纳米纤维膜。实验结果表明，载药对纤维的形态和结构没有显著影响，但

高载药量会降低纤维的结晶度、力学性能，并在一定程度上改善纤维膜的亲水性。

体外药物释放实验表明，Beri在PHBV纳米纤维膜中可持续释放30天，其累计释

放率约为80%。重要的是，与不含Beri的PHBV纳米纤维膜相比，加入Beri可显

著抑制极化巨噬细胞促炎因子的分泌，使纳米纤维膜具有良好的抗炎性能，并且载

药可有效促进人真皮成纤维细胞（HDFs）增殖，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白

色念珠菌的抑菌率均99%。在糖尿病动物实验中发现，负载高Beri含量的PHBV径

向取向纳米纤维敷料明显加快了全层皮肤创面的愈合过程，缩短了愈合时间，治疗

18天后创面愈合率接近100%，提高了再生皮肤组织中胶原纤维的沉积和新生毛囊

的数量，在一定程度上促进了新生皮肤组织再上皮化和新生血管的形成。

最后，采用甲基丙烯酸酐对明胶（Gel）和壳聚糖（Cs）进行了改性，获得了甲

基丙烯酸化明胶（MeGel）和甲基丙烯酸化壳聚糖（MeCs），以二者为成胶聚合物，

负载不同浓度的丹参葛根细胞外囊泡（DG-Evs），以前期优化的载药PHBV径向取

向纳米纤维膜为基底材料，采用光交联技术，制备了三种载药径向取向纳米纤维/水

凝胶复合敷料。研究结果表明，DG-Evs的添加会加速水凝胶的降解。小鼠肝脏急性

出血模型实验表明，三种载药径向取向纳米纤维/水凝胶复合敷料均具有优异的快速

止血性能。在糖尿病小鼠动物实验中发现，三种复合敷料在抗炎、增强细胞活性、

促进创面愈合等方面均具有显著的促进效果。其中负载高DG-Evs含量的复合敷料

第18天的创面愈合率接近100%，而且在对创面组织炎症分析发现，该复合敷料极

大的促进了M1型巨噬细胞向M2型的转化，从而降低了炎症反应。此外，负载高

DG-Evs含量的复合敷料组再生的皮肤组织再上皮化程度更高，沉积的胶原组织更加

成熟，