发酵工程课程设计.pptVIP

(2)氧化亚铜在酸性条件下，可将钼酸铵还原，还原型的钼酸铵再与砷酸氢二钠起作用，生成一种蓝色复合物即砷钼蓝，其颜色深浅在一定范围内与还原糖含量（即被还原的Cu2O量）成正比，用标准葡萄糖与砷钼酸作用，比色后用做标准，就可测得样品中还原糖含量。第29页，共47页，星期日，2025年，2月5日氨基酸含量测定以甲醛滴定法测定氨基酸含量为例进行简单说明水溶液中的氨基酸为兼性离子，因而不能直接用碱滴定氨基酸的羧基。甲醛可与氨基酸上的—N+H3结合，形成—NH—CH2OH、—N(CH2—OH)2等羟甲基衍生物，使N+H3上的H+游离出来，这样就可以用碱滴定N+H3放出H+，测出氨基氮，从而计算氨基酸的含量。若样品中只含有单一的已知氨基酸，则可由此法滴定的结果算出氨基酸的含量。若样品中含有多种氨基酸（如蛋白质水解液），则不能由此法算出氨基酸的含量。第30页，共47页，星期日，2025年，2月5日大肠杆菌生长曲线测定一定量的微生物，接种在适合的新鲜液体培养基中，在适宜的温度下培养，以菌数的对数作纵坐标，生长时间作横坐标，做出的曲线叫生长曲线。一般可分为延迟期、对数期、稳定期和衰亡期四个时期。不同的微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。第31页，共47页，星期日，2025年，2月5日测定微生物生长曲线的方法很多，有血球计数法、平板菌落计数法、称重法、比浊法等。本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与混浊度成正比，因此，可利用光电比色计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度，并将所测得的光密度值（OD值）与其对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。现已有直接用试管就可以测定OD值的光电比色计,只要接种一支试管，定期用它测定，便可做出该菌的生长曲线。第32页，共47页，星期日，2025年，2月5日查阅相关资料确定最佳培养基组成为成分葡萄糖酵母膏蛋白胨(鱼粉)(NH4)2S04K2HP04-3H2OKH2PO4MgS04微量元素母液(g／L)10.011.519.54.018．03.01.21.0第33页，共47页，星期日，2025年，2月5日第1页，共47页，星期日，2025年，2月5日小组成员候云彩201006040011李彬201006040012张媛媛201006040010殷雅楠201006040014任二硕201006040015邵冲201006040016许乃安201006040017邢利明201006040018魏永杰201006040020第2页，共47页，星期日，2025年，2月5日课题大肠杆菌的高密度发酵要求50L发酵罐第3页，共47页，星期日，2025年，2月5日大纲大肠杆菌介绍发酵介绍高密度发酵介绍实验数据及条件的确定发酵流程与控制发酵注意事项第4页，共47页，星期日，2025年，2月5日大肠杆菌介绍第5页，共47页，星期日，2025年，2月5日肠埃希氏菌(E.coli)通常称为大肠杆菌，是Escheric在1885年发现的大肠杆菌是细菌，属于原核生物；具有由肽聚糖组成的细胞壁，只含有核糖体简单的细胞器，没有细胞核有拟核；细胞质中的质粒常用作基因工程中的运载体大肠杆菌的代谢类型是异养兼性厌氧型。第6页，共47页，星期日，2025年，2月5日大肠杆菌在生物技术中的应用：大肠杆菌作为外源基因表达的宿主，遗传背景清楚，技术操作简单，培养条件简单，大规模发酵经济，倍受遗传工程专家的重视。目前大肠杆菌是应用最广泛，最成功的表达体系，常做高效表达的首选体系在培养基培养时无需添加生长因子，向培养基中加入伊红美蓝遇大肠杆菌，菌落呈深紫色，并有金属光泽，可鉴别大肠杆菌是否存在第7页，共47页，星期日，2025年，2月5日在这里必须指出的是，处于生物安全考虑，生物工程用的菌株是在不断筛选后被挑选出的菌株。这些菌株由于失去的细胞壁的重要组分，所以在自然条件下已无法生长。甚至普通的清洁剂都可以轻易地杀灭这类菌株。这样，即便由于操作不慎导致活菌从实验室流出，也不易导致生化危机。第8页，共47页，星期日，2025年，2月5日发酵介绍第9页，共47页，星期日，2025年，2月5日有机物被生物体氧化降解成氧化产物并释放能量的过程统称为生物氧化.微生物生理学把生物氧化区分为呼吸和发酵，呼吸又可进一步区分为有氧呼吸和无氧呼吸。因此，发酵是生物氧化的一种方式。工业生产上