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多不饱和脂肪酸高产菌株的选育及发酵条件优化研究

一、引言

1.1研究背景与意义

多不饱和脂肪酸（PolyunsaturatedFattyAcids，PUFAs）是指含有两个或两个以上双键且碳原子数为18或18以上的脂肪酸，主要包括γ-亚麻酸（GLA）、二高-γ-亚麻酸（DHGLA）、花生四烯酸（ARA）、二十碳五烯酸（EPA）、二十二碳六烯酸（DHA）等。PUFAs具有众多独特的生理活性，在医药、食品、化妆品等领域有着广泛应用。

在医药领域，PUFAs展现出了诸多功效。研究表明，ω-3系的PUFAs如EPA和DHA，能够抑制血小板聚集，降低血液粘稠度，延缓血栓形成，对心脑血管疾病具有重要的防治作用，可改善冠心病、心衰患者的预后，还有助于降低血压。DHA对脑细胞的分裂、增殖和神经传导突触的生长、发育发挥着重要的作用，能够加强婴儿脑细胞发育，促进胎儿及婴幼儿大脑及视力的正常发育，还能对因衰老等因素萎缩、死亡的脑细胞起到明显的修复作用，对记忆思维等智力因素起着至关重要的作用，同时也能防止脑功能衰退和老年痴呆症的发生。此外，PUFAs在肿瘤防治方面也显示出潜力，DHA能增强抗乳腺癌、直肠癌、肺癌、胰腺癌等能力。

在食品领域，PUFAs作为一种对人体健康有益的脂肪酸，被广泛应用于食品的营养强化。联合国粮农组织和世界卫生组织早在1995年推荐的膳食指南中明确规定，婴儿配方奶粉中必须含有DHA。富含DHA和AA的微生物油脂已在美国、日本、英国、法国、新西兰、澳大利亚、瑞士、荷兰等国上市。我国卫生部在2003年食品添加剂使用卫生标准增补品种中首次将二十二碳六烯酸单细胞油（DHASCO）作为营养素强化剂添加到婴幼儿食品中。国内每年DHA/AA婴幼儿奶粉消耗量约为73万吨，其中每100g奶粉中约含有50mgDHA和80mgAA，对PUFAs的市场需求巨大。

目前，PUFAs的来源主要包括动物、植物和微生物。然而，从动物和植物中获取PUFAs存在一定的局限性。从海洋动物如甲壳类和鱼类中提取PUFAs，成本太高，且鱼油资源有限，受气候、产地等条件的影响，含量不稳定，不能满足人们日益增长的需求；从月见草、黑加仑等植物籽油中提取PUFAs，产量也难以满足市场的大量需求。

相比之下，微生物发酵法生产PUFAs具有显著的优势。微生物生长周期短，能够在较短的时间内实现大量繁殖，从而快速生产PUFAs；培养条件简单，对环境要求相对较低，易于控制；不受季节和地域的限制，可以全年不间断生产，保证了产品供应的稳定性；同时，微生物发酵还可以利用农副产品和工业废弃物等廉价原料，降低生产成本，提高资源利用率，符合可持续发展的理念。因此，利用微生物发酵生产PUFAs已成为当前研究的热点和发展的趋势。

在微生物发酵生产PUFAs的过程中，高产菌株的选育以及发酵条件的优化是提高PUFAs产量和质量的关键。选育出能够高效合成PUFAs的菌株，可以从根本上提高生产效率，降低生产成本；而通过优化发酵条件，如温度、pH值、溶氧、营养物质的添加等，可以为菌株的生长和PUFAs的合成提供最适宜的环境，进一步提高PUFAs的产量和质量。本研究致力于多不饱和脂肪酸高产菌株的选育及发酵研究，旨在获得高产PUFAs的菌株，并优化发酵条件，为微生物发酵法工业化生产PUFAs提供理论依据和技术支持，具有重要的现实意义。

1.2国内外研究现状

国外对多不饱和脂肪酸高产菌株选育及发酵的研究开展较早，在多个方面取得了显著进展。在菌株选育方面，运用多种先进技术进行探索。例如，采用基因工程技术，对微生物的脂肪酸合成相关基因进行修饰和调控。通过对某些脱饱和酶基因的过表达或敲除，改变微生物体内脂肪酸的合成途径，从而提高特定PUFAs的产量。有研究通过基因编辑技术，成功提高了微藻中ω-3脂肪酸的含量。在发酵条件优化方面，国外研究人员对各种发酵参数进行了深入研究。通过优化发酵罐的设计和操作条件，如精确控制温度、pH值、溶氧等，提高了微生物发酵生产PUFAs的效率。还研究了不同营养物质对发酵的影响，通过合理调配培养基成分，进一步提高了PUFAs的产量和质量。在产业化方面，国外已经有一些成熟的微生物发酵生产PUFAs的企业，其产品在市场上占据了一定的份额。

国内对多不饱和脂肪酸高产菌株选育及发酵的研究也在不断发展。在菌株选育上，综合运用传统诱变育种技术和现代生物技术。传统诱变育种如紫外线诱变、化学诱变等，通过诱导菌株基因突变，筛选出高产突变株。同时，也积极开展基因工程育种研究，构建高效表达特定PUFAs合成相关基因的工程菌株。在发酵条件优化方面，国内