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葡萄冷藏保鲜新策略：拮抗酵母菌的筛选、鉴定与品质影响探究

一、引言

1.1研究背景

葡萄作为全球广泛种植的水果之一，不仅是鲜食的佳品，还在酿酒、制干等领域有着重要的应用。我国是世界最大的鲜食葡萄生产国和消费国，近20年来，随着葡萄育种、栽培及管理技术的提高，加上葡萄生产相对较高的经济收益吸引，我国葡萄种植已由传统的优势产区发展到全国各省区都有种植，特别是南方产区葡萄的种植面积增长较快。2022年，中国葡萄园面积为1057.67万亩，单位面积产量为1453.95千克/亩，产量为1537.79万吨。葡萄产业已成为很多地方农业生产的支柱产业，在乡村振兴、精准扶贫工作中发挥着重要作用。

然而，葡萄采后极易受到微生物的侵染而腐烂变质，造成巨大的经济损失。据统计，全球每年因果蔬采后腐烂损失的水果量高达总产量的20%-40%。在葡萄保鲜过程中，传统的化学保鲜方法虽然能够在一定程度上抑制微生物的生长，延长葡萄的保鲜期，但化学保鲜剂的使用存在诸多弊端。一方面，化学保鲜剂可能会残留在葡萄表面，对人体健康造成潜在威胁。例如，一些化学防腐剂可能会引起过敏反应、损害人体的免疫系统等。另一方面，长期使用化学保鲜剂会导致病原菌产生抗药性，使得保鲜效果逐渐下降。此外，化学保鲜剂的使用还可能对环境造成污染，破坏生态平衡。

随着人们生活水平的提高和健康意识的增强，对食品安全和环境保护的关注度越来越高，生物保鲜技术作为一种安全、环保的保鲜方法，受到了广泛的关注。生物保鲜技术是指利用生物源物质或活菌来抑制或延缓食品腐败变质，保持其良好鲜度和品质的方法。其中，拮抗酵母菌作为一种重要的生物保鲜剂，具有来源广泛、适应性和繁殖能力强、代谢产物无毒且无致敏性等特点，能够通过竞争营养物质和空间、分泌抗菌物质、寄生于病原菌及诱导宿主产生抗病性等多种途径抑制有害微生物的生长，在果蔬采后保鲜中具有广阔的应用前景。

1.2研究目的与意义

本研究旨在筛选和鉴定出对葡萄采后病害具有高效拮抗作用的酵母菌菌株，并深入研究其对葡萄冷藏品质的影响，为葡萄的生物保鲜提供理论依据和技术支持。具体研究目的如下：

从自然环境中筛选出具有高效拮抗作用的酵母菌菌株，通过形态学观察、生理生化特征分析以及分子生物学鉴定等方法，确定其分类地位。

研究筛选出的拮抗酵母菌对葡萄冷藏期间主要病原菌的抑制效果，明确其拮抗机制。

探讨拮抗酵母菌处理对葡萄冷藏品质的影响，包括果实的腐烂率、硬度、可溶性固形物含量、维生素C含量等指标，评价其保鲜效果。

分析拮抗酵母菌处理对葡萄冷藏期间抗氧化酶活性、丙二醛含量等生理指标的影响，揭示其延缓葡萄衰老的作用机制。

本研究的意义在于：

为葡萄采后保鲜提供一种安全、环保、高效的生物保鲜方法，减少化学保鲜剂的使用，降低食品安全风险，保护生态环境。

丰富拮抗酵母菌资源库，为其他果蔬的生物保鲜提供新的菌种资源和技术参考。

深入研究拮抗酵母菌对葡萄冷藏品质的影响及其作用机制，为葡萄生物保鲜技术的进一步优化和应用提供理论依据，促进葡萄产业的可持续发展。

1.3国内外研究现状

在国外，对拮抗酵母菌的研究起步较早，取得了一系列重要成果。相关研究人员从果实表面、叶片、根部、土壤和海水等多种自然环境中成功筛选出了多种具有拮抗作用的酵母菌，并对其拮抗机制进行了深入研究。研究发现，拮抗酵母菌主要通过竞争营养物质和空间、分泌抗菌物质、寄生于病原菌及诱导宿主产生抗病性等4种主要的拮抗途径抑制有害微生物的生长。例如，哈茨木霉发酵液对采后茄子进行生物保鲜，结果表明经哈茨木霉发酵液处理的茄子果实，在贮藏温度为20-25℃的条件下贮藏20d后，好果率达87%-94%（对照为20%-65%）。林德纳克勒克酵母34－9用于柑橘和番茄的储藏保鲜，柑橘经90天贮藏，好果率达90%以上，被认为是一种无公害的生物保鲜技术。

在国内，近年来对拮抗酵母菌的研究也逐渐增多。研究人员针对不同的果蔬病害，筛选出了多种具有拮抗作用的酵母菌，并对其在果蔬保鲜中的应用进行了研究。有学者采用葡萄有孢汉逊酵母和季也蒙毕赤酵母对草莓采摘前3d进行喷施处理，结果表明采前喷施拮抗酵母菌显著降低果实腐烂指数，提高商品率，能较好地保持果实外观品质。还有学者从常见植物真菌性病害中筛选出具有较强拮抗作用的酵母菌，并通过形态学特征、生理生化特征、基因测序分析确定其分类学地位。

然而，目前对于拮抗酵母菌在葡萄保鲜中的应用研究还相对较少，且主要集中在对单一病原菌的抑制效果和保鲜效果的研究上，对于拮抗酵母菌对葡萄冷藏品质的综合影响及其作用机制的研究还不够深入。因此，有必要进一步开展相关研究，以完善葡萄生物保鲜技术体系。

1.4研究方法与创新点

本研究采用的筛选方法主要包括离体筛选和活体筛选。