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表达Hpa110-42的转基因小麦抗蚜机制及关键MYB基因的筛选与鉴定

一、引言

1.1研究背景与意义

小麦作为全球重要的粮食作物，其产量和质量直接关系到粮食安全与人类生活。然而，蚜虫对小麦的危害极为严重，常大量群集于小麦叶片、茎秆、穗部，以刺吸方式吸取汁液，致使叶片枯黄、籽粒干瘪，严重时甚至导致整株死亡，最终造成大幅度减产。据相关研究显示，在我国每年超过90%的麦田都会不同程度地遭受蚜虫灾害，致使小麦减产幅度达10%-30%。并且，蚜虫在直接危害小麦的同时，还会传播多种病毒病，进一步加剧对小麦生长的破坏，造成更为严重的损失。

目前，针对小麦蚜虫的防治，主要依赖化学杀虫剂。但这种防治方式带来了一系列严峻问题。一方面，化学杀虫剂的大量使用对人类健康构成潜在威胁，其残留可能通过食物链进入人体，影响人体正常生理机能。另一方面，化学杀虫剂的使用严重破坏生态平衡，杀伤蚜虫天敌，如七星瓢虫、蚜茧蜂、食蚜蝇和草蛉等，导致生态系统中生物多样性减少。此外，长期使用化学杀虫剂还致使蚜虫抗药性不断增强，使得防治效果逐渐下降，防治成本不断攀升。因此，寻找一种安全、高效、可持续的小麦蚜虫防治方法迫在眉睫。

转基因技术的兴起为解决小麦蚜虫防治难题提供了新的方向。通过基因工程手段，将具有抗蚜特性的基因导入小麦基因组中，有望培育出具有稳定抗蚜能力的转基因小麦品种。这种方式不仅能够减少化学杀虫剂的使用，降低对环境和人类健康的危害，还能有效提高小麦的产量和质量，保障粮食安全。

在众多与植物抗逆相关的基因中，MYB基因家族作为植物转录因子中最大的家族之一，其成员在植物响应生物和非生物胁迫过程中发挥着关键作用。MYB蛋白通过与靶基因启动子区域的顺式作用元件结合，调控基因的表达，从而参与植物的生长发育、次生代谢以及对各种逆境胁迫的响应。在植物应对蚜虫等害虫侵害时，MYB基因可能通过调节植物体内防御相关基因的表达，激活植物的防御反应，增强植物对蚜虫的抗性。深入研究表达Hpa110-42的转基因小麦对蚜虫的抗性，并筛选出参与这一过程的关键MYB基因，具有重要的理论意义和实践价值。从理论层面来看，有助于深入揭示植物抗蚜的分子机制，丰富植物与害虫互作的理论体系；从实践角度出发，能够为培育具有高效抗蚜能力的转基因小麦新品种提供坚实的理论基础和基因资源，推动农业可持续发展，保障粮食生产的稳定与安全。

1.2国内外研究现状

在转基因小麦抗蚜研究领域，国内外已取得了一系列重要成果。国外方面，英国洛桑研究所（RothamstedResearch）曾致力于利用薄荷基因打造可释放化学信号驱赶蚜虫的转基因小麦，并进行了田间试验。前期实验室研究表明，该转基因小麦所产生的信息素不仅能驱赶大量蚜虫，还能吸引蚜虫的天敌寄生蜂，具有良好的抗蚜潜力。然而，后续田间试验结果显示，转基因小麦在大田环境中并未如预期般驱走蚜虫，仅在实验室条件下表现出明显效果。这一研究表明，转基因小麦抗蚜效果在不同环境下存在差异，从实验室到田间的转化面临诸多挑战。

国内研究也在积极探索转基因小麦抗蚜的有效途径。中国农业科学院作物科学研究所的科研人员利用人工合成的雪花莲凝集素基因（Galanthusnivalisagglutinin，GNA），通过基因枪转化优质品种小麦郑州9405，经过筛选获得了转基因植株。对这些转基因植株的T1代和T2代进行遗传分析和蚜虫鉴定，结果证明GNA基因已成功整合到植株中，且转基因植株能够降低蚜虫的繁殖率，降幅达50%-90%。此外，还有研究将含有掌叶半夏凝集素基因的重组表达载体导入目的小麦，获得了19个转基因小麦阳性株系，对这些阳性株系的T3代进行筛选鉴定和抗蚜实验，得到了对蚜虫具有良好抗性的转基因小麦株系。这些研究为我国转基因小麦抗蚜育种提供了重要的技术支持和实践经验。

在MYB基因研究方面，植物MYB基因家族作为转录因子中最大的家族之一，其功能研究一直是植物分子生物学领域的热点。MYB蛋白具有典型的转录因子结构和功能，包含高度保守的DNA结合结构域（MYBdomain）以及保守性相对较低的转录激活区和负调控区。研究发现，MYB基因广泛参与植物的生长发育过程，如调节植物的形态建成、控制植物的开花时间等。在植物抗逆方面，MYB基因在响应干旱、盐碱、低温等非生物胁迫中发挥着重要作用。在干旱胁迫下，某些MYB基因能够通过调控相关基因的表达，提高植物的抗旱能力；在盐碱胁迫环境中，MYB基因可调节植物体内离子平衡，增强植物对盐碱的耐受性。然而，关于MYB基因在植物抗蚜方面的研究相对较少，尤其是在转基因小麦抗蚜过程中MYB基因的作用机制尚未完全明确，存在较大的研究空白。

1.3研究目标与内容

本研究旨在深入探究表达H