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生物素-亲和素免疫放大技术、免疫组织化学技术试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题（每题2分，共20分）

1.在免疫组织化学技术中，生物素标记一抗，亲和素标记酶（如HRP），利用生物素-亲和素系统进行信号放大，其中亲和素与生物素结合的关键在于：

A.抗原抗体的特异性结合

B.亲和素与酶的共价连接

C.生物素与亲和素之间的高度特异性亲和力

D.酶催化底物的显色反应

2.下列哪一项是生物素-亲和素放大系统（BAS）最主要的优势？

A.成本相对较低

B.信号放大效果好，灵敏度极高

C.操作步骤最为简单

D.免疫背景染色极低

3.进行免疫组织化学染色时，抗原修复的目的是：

A.使组织切片变得透明

B.破坏组织结构，利于抗体进入

C.恢复或暴露抗原决定簇，增强抗体结合

D.杀灭组织中的残余酶活性

4.在IHC实验中，使用封闭液（如血清）的主要目的是：

A.固定组织中的抗原

B.阻止非特异性抗体与组织成分结合

C.提供酶的底物

D.增强一抗的渗透性

5.若IHC实验结果显示背景染色过高，可能的原因不包括：

A.封闭不充分

B.一抗或二抗浓度过高

C.抗原修复过度

D.使用的亲和素质量不佳

6.与直接法免疫组化相比，酶标二抗法免疫组化：

A.灵敏度更高

B.操作步骤更少

C.需要标记一抗和二抗两种抗体

D.特异性更好

7.DAB（3,3-二氨基联苯胺）是免疫组化中常用的酶底物，其主要用于哪种标记的酶？

A.过氧化物酶（HRP）

B.碱性磷酸酶（AP）

C.荧光素酶

D.超氧化物歧化酶

8.在免疫荧光技术中，如果使用亲和素标记荧光素，则其结合的抗体应该是：

A.一抗（针对抗原）

B.二抗（针对一抗）

C.生物素化的抗抗体

D.直接标记在一抗上的荧光素

9.下列哪种技术通常不适用于石蜡包埋的组织样本？

A.免疫组化（IHC）

B.原位杂交（ISH）

C.荧光原位杂交（FISH）

D.电子显微镜免疫金染色

10.生物素在生物素-亲和素系统中扮演的角色是：

A.信号放大介质

B.最终的显色底物

C.连接酶与抗原的桥梁

D.用于封闭非特异性位点

二、填空题（每空1分，共15分）

1.免疫组织化学（IHC）是利用______与______之间的高度特异性结合，在组织细胞原位检测______的技术。

2.生物素-亲和素系统（BAS）的核心优势在于其______效应，可以显著提高IHC的______。

3.IHC实验流程通常包括样本处理、抗原修复、______、______、______、显色/信号检测和封片等主要步骤。

4.选择一抗时需要考虑其______、______和______等因素。

5.封闭操作通常在抗原修复之后进行，目的是防止______与组织成分的非特异性结合，降低______。

6.根据标记物不同，IHC可分为______法、______法和______法等主要类型。

7.若IHC实验中信号过弱，可能的原因包括______不足、______浓度过低、______效果不佳或______选择不当等。

三、名词解释（每题3分，共12分）

1.免疫组织化学（IHC）

2.信号放大

3.抗原修复

4.生物素-亲和素系统（BAS）

四、简答题（每题5分，共15分）

1.简述生物素-亲和素放大技术（BAA）的基本原理及其在IHC中的作用。

2.比较直接法IHC和酶标二抗法IHC的主要区别。

3.简述IHC实验中常见的背景染色及其可能的原因。

五、论述题（10分）

结合免疫组织化学（IHC）的基本流程，阐述生物素-亲和素放大技术（BAA）在提高实验灵敏度、特异性或简化操作方面的具体体现，并讨论使用BAA技术可能遇到的问题及相应的解决策略。

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试卷答案

一、选择题

1.C

*解析思路：生物素-亲和素系统的核心是生物素与亲和素之间极高的特异性亲和力（非共价键结合），这种结合是信号放大的基础。

2.B

*解析思路：BAS的主要优势在于其级联放大效应，能够将初始抗原抗体反应的信号放大许多倍，从而显著提高检测的灵敏度。

3.C

*解析思路：抗原修复