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遗传性肝脏疾病基因治疗的研究进展

【摘要】遗传性肝脏疾病是指因基因突变所引起的肝脏代谢障碍性疾病，现有的

临床治疗多以对症治疗、延缓肝脏损伤和改善患者生活质量为主。随着基因治疗

技术的不断发展，通过修饰已知基因变异来治疗遗传性疾病已逐渐成为可能。该

文综述了几种常见的基因治疗方法（包括重组腺相关病毒载体、CRISPR/Cas9、

反义寡核苷酸、脂质纳米颗粒-mRNA），通过分析遗传性肝脏疾病的相关临床前

研究和已进行的药物临床试验结果，讨论了目前遗传性肝脏疾病基因治疗的最新

研究进展、正在面临的挑战以及潜在的解决方案，以期推动基因治疗的进一步发

展，并为治疗其他复杂疾病提供参考。

【关键词】遗传性肝脏疾病；基因治疗；载体

基因治疗是一种通过将遗传物质转移到患者细胞内，以修饰个体基因或蛋白

质表达，最终达到治疗疾病目的的新型治疗方法［1］。美国食品药品监督管理

局将基因治疗定义为利用核酸、病毒或基因工程微生物将遗传物质通过转录或翻

译转移或整合到宿主基因组中来治疗疾病［2］。数十年来，基因治疗的研究在

遗传性疾病治疗中取得重大进展，尤其是罕见病及单基因遗传疾病，且已有基因

治疗相关药物被开发和批准使用。肝脏是治疗性基因递送的热门靶器官，因为肝

脏具有血流丰富、纳米载体摄取和积累量高的特点。同时，由于许多肝脏相关疾

病与基因突变有关，基因治疗也是肝脏疾病的合理治疗方法。大量研究已证实病

毒载体用于基因治疗的潜力，但逆转录病毒需刺激肝细胞、腺病毒引发炎症、慢

病毒生产复杂等问题仍限制其应用［3］。重组腺相关病毒（recombinantaden

o-associatedvirus，rAAV）因其非致病性、低免疫原性和高效转基因能力成

为主流递送系统。其衣壳结构与野生型AAV类似，但编码序列被替换为表达盒，

兼具安全性与可规模化生产［4］。然而，rAAV治疗先天性肝病时仍面临局限：

在儿童肝细胞持续分裂过程中治疗效果可能减弱，并存在肝癌风险、免疫激活、

肝毒性及遗传毒性等问题。由成簇规律间隔短回文重复序列（CRISPR）和CRISP

R相关蛋白（CRISPR-associatedprotein，Cas）组成的CRISPR/Cas系统源自

细菌免疫机制，可通过Cas9蛋白实现对特定基因的编辑或调控，但其体内递送

仍具挑战［5］。Wan等［6］开发的外泌体RNP系统利用肝星状细胞来源的外泌

体装载Cas9RNP，实现肝特异性递送，在多种肝病模型中显示良好编辑效果与治

疗潜力。反义寡核苷酸（antisenseoligonucleotides，ASO）则通过碱基配对

靶向RNA，调控剪接或降解mRNA，从而影响蛋白表达，属于广义基因治疗策略［7

-8］。目前已有多款ASO药物获批，但其长期安全性仍需评估［9-10］。脂质纳

米颗粒（lipidnanoparticles，LNPs）可封装mRNA，保护其免于降解，并通

过内吞作用递送入细胞质表达目标蛋白［11］。LNP-mRNA技术具有非整合、低

免疫原性、可重复给药等优势，但其表达具有瞬时性，需多次给药［12-13］。

尽管迄今为止基因治疗已颇有成效，上述基因治疗技术各具特点与适用范围，但

其安全性、特异性及持久性仍是未来临床转化需重点研究的方向。本综述探讨了

几种遗传性肝脏疾病基因治疗的最新进展、相关挑战以及当前的潜在解决方案。

1尿素循环障碍（ureacycledisorder，UCD）

UCD指在尿素循环代谢过程中因为酶或转运体缺陷引起氨解毒或精氨酸合

成障碍的一组遗传代谢疾病，以血氨升高为主要特征［14］。与尿素循环相关的

酶包括氨甲酰磷酸合成酶（carbamoylphosphatesynthetase，CPS）、精氨酸

琥珀酸合成酶（arginino‐succinatesynthetase，AS）、精氨酸琥珀酸裂解

酶（argininosuccinatelyase，AL）、精氨酸酶（arginase，ARG）、N-乙酰谷

氨酸合成酶（N-acetylglutamatesyn‐thase，NAGS）、鸟氨酸氨甲酰基转移

酶（ornithine‐transcarbamylase，OTC），基因突变导致任何一种酶缺陷，

都会导致UCD的发生。

对于CPS1缺陷，CPS1基因的大小和有限的AAV包装能力需要使用两个AAV

载体的分裂方法［15］。然而，在CPS1缺乏和其他尿素循环疾病的临床前研究

中，AAV已显示了表型纠正、增加生存率、改善生长、氨和