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真菌发酵工艺优化及其生物活性物质提取研究

目录

内容概览．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1.1微生物发酵技术概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.1.2真菌在生物活性物质生产中的作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

1.1.3研究目的与预期目标．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

1.2文献综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

1.2.1国内外真菌发酵的研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

1.2.2生物活性物质提取方法的比较分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

1.2.3本研究的创新点与贡献．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

实验材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

2.1.1菌种选择与培养条件．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

2.1.2发酵基质与培养基配方．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

2.1.3实验所用仪器设备与试剂．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

2.2实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

2.2.1真菌发酵工艺的优化设计．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

2.2.2生物活性物质的提取与纯化技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

2.2.3生物活性物质含量测定方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

结果分析与讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

3.1发酵工艺参数对生物活性物质产量的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

3.1.1温度、pH值、接种量等关键因素的优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

3.1.2发酵过程中生物活性物质的变化趋势．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

3.1.3工艺参数优化前后的对比分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

3.2生物活性物质的结构鉴定与性质分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

3.2.1高效液相色谱质谱联用(HPLCMS)分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

3.2.2X射线衍射(XRD)分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43

3.2.3红外光谱(FTIR)分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46

3.2.4核磁共振(NMR)分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46

3.3生物活性物质的生物活性评价．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48

3.3.1体外细胞毒性测试．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49

3.3.2体内动物模型试验．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．52

3.3.3临床前安全性评估．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．53

结论与展望．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．54

4.1主要研究结论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．57

4.1.1发酵工艺优化的效果评估．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．57

4.1.2生物活性物质提取效率的提升．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．59

4.1.3生物活性物质的生物活性验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．61

4.2研究局限性与不足．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．65

4.2.1实验条件的限制性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．