第七章旋光色散和园二色光谱.pptVIP

7.4.1氨基酸和多肽的园二色性氨基酸分子内的紫外生色基团有吲哚基、酚羟基、苯基、二硫键，咪唑基和羧基。当这些生色基团受到不对称碳原子或其它不对称结构的影响时，在它们各自的吸收区域里表现出圆二色性。研究氨基酸（主要是芳香族氨基酸和胱氨酸）以及它们的衍生物的CD性质，为研究蛋白质的CD谱提供基本的材料。同时，活性肽有重要的生理功能，因此肽的构象与功能的关系是重要的分子生物学课题。肽的构象也是蛋白质构象的一种模型。肽的圆二色性为研究肽在溶液中的构象提供了许多重要的信息。第62页，共125页，星期日，2025年，2月5日7.4.1.1氨基酸的圆二色谱?7.4.1.1.1酪氨酸及其衍生物的近紫外CD谱酪氨酸及其衍生物在中性水溶液中的CD谱都在275nm左右显示CD峰。下图表示N-乙酸酪氨酸酰胺在水溶液中的CD谱。275nm左右的峰可正可负，视模型化合物以及所用溶剂而定。在水溶液中，CD峰处的椭圆值在＋660到－660间，比一般蛋白质中每个酪氨酸残基的CD贡献要小得多。第63页，共125页，星期日，2025年，2月5日在有机溶剂中或在低温下，酪氨酸及其衍生物的CD峰值显著增大。Strickland等得到在低温下酪氨酸衍生物在有机溶剂中的CD谱，它们能清楚地显示酪氨酸CD谱的振动结构。但即便在室温下的水溶液中，一般酪氨酸衍生物的CD谱仍能显示一峰一肩（见下图），肩在峰的长波长一侧。溶剂组成的改变能影响谱带的位置。酪氨酸酚羟基如和其他质子受体组成氢键，则其CD谱会产生较大的红移。第64页，共125页，星期日，2025年，2月5日第65页，共125页，星期日，2025年，2月5日有些酪氨酸衍生物如N-乙酰-O-甲-酪氨酸乙酯在甲基环己烷中显示的CD谱形和其吸收谱形几乎完全一样，这说明这个化合物在此溶剂中以单一的构象子（Conformer）存在，但有许多模型化合物在溶液中以处于平衡状态的多个构象子存在。每个构象子的CD谱各不相同，有正有负。这些CD谱叠加起来，使得观察到的CD谱和吸收谱不一致的情形出现。酚羟基在碱性溶液中解离时，给出290nm以上的CD峰，峰形和峰位与其吸收谐相似。第66页，共125页，星期日，2025年，2月5日7.4.1.1.2色氨酸及其衍生物的近紫外CD谱色氨酸的近紫外CD谱波长位置不大受溶剂条件的影响，一般在288-292nm间。溶剂对波长位置的影响，氢键的形成，使色氨酸及其衍生物的CD谱出现多种多样的情况。第67页，共125页，星期日，2025年，2月5日7.4.1.1.3苯丙氨酸及其衍生物的近紫外CD谱由于苯环的高度对称性，苯丙氨酸侧链的CD值和上述两个芳香族氨基酸相比要小得多（见上图）。典型的苯丙氨酸模型化合物的CD谱在250－268nm间显示多个振动能级峰，尤其是268nm谱段，在室温下也能显示陡直的峰形。第68页，共125页，星期日，2025年，2月5日7.4.1.1.4芳香族氨基酸以及它们衍生物的远紫外CD谱芳香族氨基酸以及它们的衍生物在250nm以下都有较强的CD贡献（下图），在这个区域内，苯丙氨酸的CD值和酪氨酸或色氨酸的相差不多，这和近紫外区域的情况形成对照。在酪氨酸的各种模型化合物中，226nm左右的CD峰总是正的。第69页，共125页，星期日，2025年，2月5日??，N-乙酰酪氨酰胺；---，N-乙酰苯丙氨酸胺；……，N-乙酰色氨酰胺．第70页，共125页，星期日，2025年，2月5日7.4.1.1.5胱氨酸及其衍生物的紫外CD谱胱氨酸在水溶液中的CD谱中，近紫外区的负峰归属于二硫键，远紫外区的正峰归属于羧基贡献。和其他氨基酸的羧基贡献比，此正峰出现在较长的波长位置上，这可能是由于羧基和二硫键两个基团电子的相互作用，因而降低了羧基跃迁的能量；也可能由短波长区域的二硫键的强负CD峰的存在造成。胱氨酸的各种衍生物在水溶液中也显示相近的CD谱。第71页，共125页，星期日，2025年，2月5日第72页，共125页，星期日，2025年，2月5日二硫键是个具有不对称的生色基团，其正常的双面角接近90?，有右手(P)和左手(M）两种旋转构象，在胱氨酸及其简单衍生物的溶液中，二硫键以几乎等量的P和M构象存在，因而它们的CD贡献互相抵消，即二硫键的固有不对称性并不对CD谱作出贡献。胱氨酸及其简单衍生物的CD谱只来源于不对称碳原子对二硫键的扰动。胱氨酸以晶体形式存在时，其二硫键只能采取某一种构象。对它的晶体所作的CD研究显示，波长最长的CD谱段可能与二硫键的手征性有关，即P构象显示正CD峰，M构象显示负CD峰。第73页，共125页，星期日，2025年，2月5日7.4